DDB2基因不同转录本在胃癌与正常组织中表达差异及其对胃癌细胞生物学行为的影响

发布时间：2022-07-20 13:44

　　目的探讨DDB2基因不同转录本在胃癌及其远端正常组织中表达差异及其对胃癌细胞生物学行为的影响。方法选取68对胃癌组织及其对应的远端正常胃组织,制成组织芯片,通过免疫组化染色分析胃癌及正常组织中常态转录本WT编码蛋白的表达差异。而后提取48对胃癌和远端正常胃组织的总RNA,利用qPCR检测DDB2基因WT、D1转录本的表达水平。而后通过qPCR检测多种胃癌细胞系中DDB2不同转录本的本底表达水平并构建DDB2 WT和D1过表达质粒,分别将空载体和两种质粒转染入胃癌细胞系并进行分组。应用WB实验检测转染情况并根据转染情况与其本底表达情况筛选工具细胞系。通过CCK-8实验与Transwell实验检测各组细胞的增殖与迁移能力。通过WB实验检测各组细胞的上皮间质化与凋亡情况。结果DDB2 WT转录本编码蛋白在胃癌与正常组织之间无明显差异。在RNA水平,胃癌组织中DDB2 D1转录本的在表达显著高于远端正常组织（P<0.05）,而WT转录本在两者间表达无明显差异。体外实验中,WT转录本促进胃癌细胞增殖但抑制其迁移能力（P<0.05）,而D1转录本抑制增殖但促进其迁移能力（P<0.... 

【文章页数】：45 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
英文缩略语
第一部分 DDB2在胃癌与其远端正常胃组织中的表达差异
    1 前言
    2 材料与方法
        2.1 主要试剂耗材与仪器
        2.2 方法
    3 结果
        3.1 DDB2WT编码蛋白在胃癌与远端正常胃组织中表达量无明显差异
        3.2 DDB2基因WT、D1转录本在胃癌与远端正常组织中的RNA表达水平
    4.讨论
第二部分 DDB2不同转录本对胃癌细胞生物学行为的影响
    1 前言
    2 材料方法
        2.1 主要试剂耗材和仪器设备
        2.2 方法
    3 结果
        3.1 工具细胞系的筛选
        3.2 DDB2 WT转录本促进胃癌细胞增殖而抑制迁移,D1转录本抑制胃癌细胞增殖而促进迁移
        3.3 DDB2 WT、D1转录本对胃癌细胞的凋亡与EMT现象无明显影响
    4 讨论
本研究创新性自我评价
参考文献
综述
    参考文献
攻读期间取得研究成果
致谢
个人简历



本文编号：3664108