甘遂2个ATG8同源基因的表达分析及愈伤培养和离体快繁培养

发布时间：2022-08-07 17:14

　　甘遂（Euphorbia kansui Liou）是大戟科（Euphorbiaceae）大戟属（Euphorbia）的多年生草本植物,是我国特有的一种传统中药,入药部位为其块根,主治水肿、咳喘、肿瘤等病症。每年7、8月份幼苗由种子或留在地下的块根形成,12月份生长停止,完成营养生长,到次年3月份幼苗出土,4月份开花,5月底果实成熟,完成生殖生长。甘遂全株各部位均有白色乳汁,其为乳汁管的细胞质。甘遂的乳汁管为无节分枝乳汁管,其有效成分如萜类和类黄酮等物质大多产生并储存于乳汁中,因此研究乳汁管的发育具有很重要的理论和实践意义。细胞自噬是一种高度保守的物质循环过程,主要是调控长寿命蛋白质和功能异常的细胞器的降解。我们课题组在甘遂的乳汁管中观察到线粒体、质体等细胞器与类似溶酶体的小型酸性细胞器融合的现象,并在甘遂转录组数据中发现了自噬相关基因。基于此,我们根据甘遂转录组信息克隆了自噬相关蛋白ATG8家族的2个同源基因（ATG8c和ATG8f）的CDS序列,并分析了其在根、茎、叶和乳汁中的表达,同时建立了甘遂快繁生芽和生根以及愈伤组织培养的最佳条件,为后续甘遂乳汁管自噬发生模式、构建ATG8转基... 

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 引言
    1.1 甘遂及其乳汁管的研究概况
        1.1.1 甘遂的研究进展
        1.1.2 甘遂乳汁管的研究进展
    1.2 植物自噬研究概况
        1.2.1 植物自噬的研究进展及作用
        1.2.2 植物自噬相关基因及ATG8的研究进展
    1.3 植物组织培养的研究进展
        1.3.1 影响植物组织培养的主要因素
        1.3.2 褐化的控制
    1.4 研究目的及意义
第二章 研究材料和方法
    2.1 材料、试剂及仪器
        2.1.1 材料
        2.1.2 菌株及载体
        2.1.3 试剂盒与酶
        2.1.4 主要器材及仪器设备
        2.1.5 培养基、试剂、缓冲液及配制方法
    2.2 研究方法
        2.2.1 甘遂自噬相关基因ATG8CDS序列的克隆及分析
        2.2.2 愈伤培养及形态观察
        2.2.3 快繁体系的建立
第三章 研究结果
    3.1 甘遂自噬相关基因CDS序列的克隆及表达分析
        3.1.1 甘遂根、茎、叶及乳汁总RNA的质量检测
        3.1.2 ATG8c、ATG8f编码序列(CDS)的克隆及回收
        3.1.3 CDS的测序
        3.1.4 同源比对及进化树分析
        3.1.5 ATG8的2个同源基因在甘遂根、茎、叶及乳汁中的表达分析
    3.2 甘遂的愈伤培养
        3.2.1 外植体的选择及消毒条件的筛选
        3.2.2 不同激素组合的愈伤诱导情况
    3.3 甘遂的快繁培养
        3.3.1 不同激素组合的快繁诱芽情况及增殖培养
        3.3.2 不同激素对诱导快繁生根的影响
第四章 讨论与结论
    4.1 2个ATG8同源基因的表达分析
    4.2 组培中消毒时间对后期培养的影响
    4.3 不同激素对愈伤组织培养的影响
    4.4 不同激素对快繁生根的影响
    4.5 结论
参考文献
攻读硕士学位期间取得的学术成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]濒危植物南川木菠萝组织培养技术研究[J]. 吴军.  现代农业科技. 2016(19)
[2]药用植物组织培养中褐化现象的研究进展[J]. 戴莹,杨世海,赵鸿峥,赵连华.  中草药. 2016(02)
[3]红叶乌桕组织培养技术研究[J]. 毕君,张往祥,王春荣,曹福亮.  中国农学通报. 2013(28)
[4]臭马比木茎段培养中污染控制和防褐化研究[J]. 邓添,谢少雄,董世超,王承恩,李克克,陈剑锋,杨妙贤.  广东农业科学. 2013(06)
[5]培养基和调节剂对臭椿茎段腋芽诱导的影响[J]. 陈峰,汪贵斌,游庆方,章霞,黄广远.  林业科技开发. 2013(02)
[6]铁皮石斛快繁技术体系研究[J]. 常美花,金亚征,王莉.  中草药. 2012(07)
[7]取材时期对文冠果优树芽启动的影响[J]. 王非,孙赟璐,李在善,李玉花,李风日,李成德,由香玲.  东北林业大学学报. 2012(04)
[8]不同激素配比对橡胶树叶片愈伤组织诱导的影响[J]. 孙爱花,华玉伟,黄天带,周权男,戴雪梅,黄华孙.  中国农学通报. 2012(04)
[9]巴西橡胶树花药体胚发生类型及其培养条件的改良[J]. 谭德冠,孙雪飘,付莉莉,马帅,张家明.  热带作物学报. 2011(07)
[10]甘遂在痰证中的应用[J]. 金伟孝.  中国中医基础医学杂志. 2011(06)

博士论文
[1]基于转录组测序对UV-B辐射下甘遂乳汁的比较蛋白质组学研究[D]. 赵雪艳.西北大学 2016
[2]甘遂的化学成分及其生物活性的研究[D]. 王立岩.沈阳药科大学 2003

硕士论文
[1]番茄快繁及遗传转化体系的优化研究[D]. 常婧.山西农业大学 2015
[2]长叶点地梅（Androsace longifolia）组织培养与细胞悬浮培养条件初探[D]. 陈素波.东北林业大学 2013
[3]蓝雪花（Plumbago auriculata）植物组织培养技术研究[D]. 陈毅.四川农业大学 2013
[4]梨茎尖和叶片高效离体繁殖再生体系建立[D]. 宗娟.安徽农业大学 2010
[5]牡丹离体快繁技术的研究[D]. 邱金梅.北京林业大学 2010
[6]牡丹离体快繁及多胺对组培苗生根影响的研究[D]. 张颖星.北京林业大学 2008
[7]牡丹组织培养技术的优化研究[D]. 吴丹.中国林业科学研究院 2007
[8]拟南芥自体吞噬家族AtATG8的克隆及转基因苗的筛选[D]. 王庆华.山东师范大学 2007



本文编号：3670720