露地菊PIP1/2基因的遗传转化及抗盐性验证

发布时间：2022-08-12 20:37

　　露地菊是北方重要的园林绿化花卉之一,具有管理粗放、植株矮小、花色繁多等特点。质膜内在蛋白（Plasma membrane intrinsic proteins,PIPs）作为水孔蛋白超家族MIP家族的一员,能够调节植物细胞间水分平衡,参与渗透胁迫应答,调节气孔运动,在植物抗逆境胁迫中起到重要的作用。为研究露地菊CmPIP1和CmPIP2基因功能,选取了东北林业大学生命科学学院花卉生物工程研究所选育的五种露地菊:’粉纱裙’、’金秋’、’紫涛’、’火焰’、’粉佳人’,在不同NaCl浓度培养下,探寻不同植株的抗盐能力,及叶片中Na+、K+的含量和CmPIP1/2基因相对表达量的关系。同时研究CmPIP1和CmPIP2在露地菊’火焰’中的表达特性。利用实验室已构建的CmPIP1和CmPIP2的过表达和干涉载体,通过农杆菌侵染的方法,获得CmPIP1和CmPIP2的过表达和干涉露地菊’火焰’转基因植株,并对转基因植株进行抗盐性验证,为培育出抗盐能力更强的露地菊新品系提供有力的分子基础,丰富盐碱地区花卉种植品种。本研究的主要结果如下:1.露地菊’粉纱裙’、’金秋’、’紫涛’、’火焰’、’粉佳人’分... 

【文章页数】：46 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
1 绪论
    1.1 露地菊研究概况
    1.2 PIP基因的研究进展
    1.3 植物抗性研究
    1.4 本研究的目的和意义
2 五种露地菊抗盐性比较及与CmPIP表达量的相关性分析
    2.1 材料与试剂
        2.1.1 试验材料
        2.1.2 试验试剂
    2.2 试验方法
        2.2.1 五种露地菊Na+和K+含量的测定
        2.2.2 五种露地菊中CmPIP1和CmPIP2基因相对表达量分析
            2.2.2.1 露地菊叶片总RNA的提取
            2.2.2.2 Real-Time PCR反应测定CmPIP1和CmPIP2的相对表达量
    2.3 结果与分析
        2.3.1 五种露地菊Na~+和K~+含量的测定
        2.3.2 五种露地菊K~+/Na~+含量比值与CmPIP表达量的相关性
    2.4 讨论
    2.5 本章小结
3 露地菊CmPIP1和CmPIP2基因表达特性分析
    3.1 材料与试剂
    3.2 试验方法
        3.2.1 露地菊CmPIP1和CmPIP2基因生物节律
        3.2.2 露地菊CmPIP1和CmPIP2基因组织特异性
    3.3 结果与分析
        3.3.1 露地菊CmPIP1和CmPIP2基因生物节律
        3.3.2 露地菊CmPIP1和CmPIP2基因组织特异性
    3.4 讨论
    3.5 本章小结
4 CmPIP遗传转化露地菊及抗盐性验证
    4.1 材料与试剂
        4.1.1 试验材料
        4.1.2 试验试剂
    4.2 试验方法
        4.2.1 CmPIP1和CmPIP2遗传转化露地菊
        4.2.2 转基因植株的鉴定
        4.2.3 MDA含量测定
        4.2.4 转基因植株表型鉴定
    4.3 结果与分析
        4.3.1 CmPIP1和CmPIP2遗传转化露地菊
        4.3.2 转基因植株的鉴定
        4.3.3 盐胁迫下转基因植株MDA含量测定
        4.3.4 转基因植株表型鉴定
    4.4 讨论
    4.5 本章小结
结论
参考文献
攻读学位期间发表的学术论文
致谢


【参考文献】：
期刊论文
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博士论文
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硕士论文
[1]过表达AtTIP和AtNHX基因对拟南芥耐盐性的影响[D]. 刘倩.曲阜师范大学 2016
[2]野生毛葡萄质膜水通道蛋白基因的克隆与功能验证[D]. 颜培玲.贵州大学 2015
[3]露地菊品种‘紫秋裳’再生及遗传转化体系的建立[D]. 高晓霞.东北林业大学 2014
[4]根癌农杆菌介导PCFH基因转化菊花的研究[D]. 王欢.北京林业大学 2007
[5]利用农杆菌介导法将类胡萝卜素合成酶基因LycB导入番茄、菊花的研究[D]. 任永霞.中国人民解放军军需大学 2003



本文编号：3676556