辛伐他汀通过调控Chk1基因的表达对宫颈癌细胞增殖、凋亡以及放疗敏感性的影响

发布时间：2022-09-17 14:22

　　目的:探讨辛伐他汀（simvastatin,SVA）通过调控细胞周期检测点激酶1（checkpoint kinase 1,Chk1）基因表达对宫颈癌细胞增殖、凋亡及放疗敏感性的影响。方法:体外培养宫颈癌Hela细胞,采用不同浓度（3.25μmol/L、6.25μmol/L、12.5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L）SVA处理细胞,以0μmol/L SVA为空白组（Con组）。采用MTT法检测SVA对细胞的增殖抑制率,筛选SVA最适浓度（SVA组）用于后续研究。流式细胞术检测各组细胞凋亡率。采用2、4、6、8 Gy剂量X射线照射细胞。将Chk1阴性对照质粒、Chk1 si RNA分别转染至Hela细胞,分别命名为si-NC、si-Chk1组;重组pc DNA 3. 1/Chk1基因过表达质粒及空载体对照质粒分转染至SVA组细胞中,分别命名为SVA+pc DNA-Chk1组、SVA+pc DNA组。采用q RT-PCR与Western blot法检测各组细胞中Chk1 m RNA及蛋白表达水平; MTT法检测各组细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡情况;克隆形成实验检测细胞... 

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验细胞与主要试剂
    1.2 实验方法
        1.2.1 细胞培养及照射条件
        1.2.2 MTT法检测SVA对细胞增殖的抑制作用
        1.2.3 流式细胞术检测细胞凋亡率
        1.2.4 细胞转染
        1.2.5 克隆形成实验
        1.2.6 实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测Chk1 mRNA表达水平
        1.2.7 蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Chk1蛋白表达水平
    1.3 统计学方法
2 结果
    2.1 不同浓度SVA对宫颈癌Hela细胞增殖抑制率的影响
    2.2 SVA对宫颈癌Hela细胞凋亡率的影响
    2.3 SVA对宫颈癌Hela细胞放疗敏感性的影响
    2.4 SVA对宫颈癌Hela细胞中Chk1基因表达的影响
    2.5 抑制Chk1表达对宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡、放疗敏感性的影响
    2.6 过表达Chk1逆转了SVA对宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡和放疗敏感性的影响
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
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[5]辛伐他汀对缺氧黑素瘤细胞A375增殖凋亡及迁移的影响[J]. 李娟,李立.  中华皮肤科杂志. 2017 (10)
[6]米非司酮对人宫颈癌Hela细胞放疗敏感性的影响及作用机制[J]. 魏敏,杜文升,陆晓媛,王侠,王世良.  徐州医学院学报. 2017 (01)
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[10]siRNA沉默Chk1基因对二烯丙基二硫诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡敏感性的影响[J]. 刘志祥,李瑞明,王晓勋.  现代肿瘤医学. 2015(05)



本文编号：3679394