H120和4/91疫苗株对IBV QX基因型毒株差异保护机理的初探

发布时间：2022-09-17 12:53

　　禽传染性支气管炎（Infectious bronchitis,IB）是由禽传染性支气管炎病毒（Infectious bronchitis virus,IBV）引起家禽的一种急性、高度传染性疾病,给养禽业带来了巨大的经济损失。目前,疫苗免疫接种仍是IB有效的防治措施之一,但IBV容易发生变异,出现新的血清型和基因型。因此,疫苗对流行株的免疫保护效果存在差异。前期研究结果显示,常用的两种弱毒疫苗4/91和H120对当下流行基因型QX型毒株的保护效果有差异,但是其机理尚不清楚。本文拟用4/91和H120分别免疫鸡群,检测免疫后细胞免疫应答、体液免疫应答和局部气管黏膜免疫应答的差异,然后用QX型毒株A/CK/MeiShan/17株（简称MS株）进行攻毒,统计发病率和死亡率、观察组织病变、检测细胞免疫相关基因的表达和攻毒毒株的病毒载量,以期揭示4/91和H120弱毒疫苗的差异保护的机理。本文分别构建了细胞免疫相关的三个基因（PFP、GAMA、IFN-γ）、内参基因（ACTB）和攻毒毒株检测基因1a（MS1a）的标准曲线,试验结果表明:建立的五个标准曲线扩增效率（E）分别为1.95、2.00、1.... 

【文章页数】：79 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
中英文缩写对照表
第一部分 文献综述及选题意义
    1 鸡传染性支气管炎概述
        1.1 病原学
        1.2 IBV的流行趋势
        1.3 IBV疫苗的研究进展
        1.4 局部黏膜免疫和特异性免疫应答
        1.5 IB实验室诊断技术
    2 研究的目的和意义
第二部分 试验内容
    试验一 荧光定量标准曲线的建立
        1 试验材料
            1.1 试验样品、菌株和毒株
            1.2 主要试剂和仪器
            1.3 常用试剂的配置
            1.4 荧光定量引物的设计
        2 试验方法
            2.1 总RNA的提取和cDNA的合成
            2.2 标准质粒的构建
            2.3 反应条件的优化
            2.4 标准曲线的建立
            2.5 敏感性检验
            2.6 重复性分析
            2.7 引物特异性鉴定
        3 试验结果
            3.1 目的基因的扩增和标准质粒的构建
            3.2 标准质粒浓度测定
            3.3 条件优化结果
            3.4 标准曲线的建立
            3.5 敏感性试验结果
            3.6 重复性检测结果
            3.7 引物特异性试验结果
        4 讨论
    试验二 两种弱毒疫苗对QX型毒株差异保护机理的研究
        1 材料
            1.1 疫苗和毒株
            1.2 主要试剂和仪器
        2 动物试验
            2.1 EID_(50)的测定
            2.2 动物试验设计
            2.3 免疫后样品的采集和检测
            2.4 攻毒后样本的采集和检测
        3 动物试验结果
            3.1 病毒EID_(50)的测定结果
            3.2 免疫后免疫相关指标的测定
            3.3 攻毒后相关指标的测定
        4 分析和讨论
            4.1 二免后鸡群外周血T淋巴细胞百分含量的分析
            4.2 二免后鸡群血清中特异性抗体水平的分析
            4.3 二免后鸡群气管中SIgA抗体水平的分析
            4.4 攻毒后鸡群免疫保护率和组织病变的差异分析
            4.5 攻毒后两株弱毒疫苗对组织保护效果差异分析
结论
参考文献
致谢
作者简历



本文编号：3679260