GTPBP4基因沉默介导EGFR/PI3K/AKT信号通路对顺铂诱导的胃癌细胞凋亡的调控机制

发布时间：2022-09-21 20:46

　　目的:探讨GTP结合蛋白4 （GTPBP4）基因介导EGFR/PI3K/AKT信号通路对顺铂诱导的胃癌细胞凋亡的调控机制。方法:选取人胃癌细胞株MGC-803、NCI-N87、SGC-7901、MKN-45及人胃黏膜上皮细胞株GES-1,筛选癌细胞中GTPBP4表达最高的细胞株并分为6组:Blank组（胃癌细胞不做处理）、阴性对照组（转染含有无关序列的重组质粒）、GTPBP4 shRNA组（转染含有GTPBP4 shRNA的重组质粒）、GTPBP4过表达组（转染含有GTPBP4片段的重组质粒）、EGFR/PI3K/AKT inhibitor组（EGFR/PI3K/AKT通路抑制剂处理细胞）、Combined treatment组（EGFR/PI3K/AKT通路抑制剂联合GTPBP4 shRNA处理细胞）,分别给予顺铂处理。qRT-PCR和Western blot检测EGFR/PI3K/AKT信号通路和凋亡相关基因的mRNA和蛋白表达水平。MTT法检测各组细胞的增殖活力。Transwell检测各组细胞侵袭情况。流式细胞术检测各组细胞凋亡情况。结果:与人胃黏膜上皮细胞相比,胃癌细胞株中GT... 

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 GTPBP4基因沉默及过表达重组质粒构建
        1.2.2 细胞培养及分组转染
        1.2.3 半数抑制浓度(IC50)测定
        1.2.4 qRT-PCR检测基因相对表达水平
        1.2.5 Western blot检测蛋白相对表达
        1.2.6 MTT法测定细胞增殖活力
        1.2.7 Transwell细胞侵袭实验
        1.2.8 流式细胞术检测细胞凋亡
    1.3 统计学处理
2 结果
    2.1 GTPBP4在胃癌细胞中的表达情况
    2.2 MKN-45细胞株顺铂诱导浓度确定
    2.3 顺铂下调胃癌细胞GTPBP4表达
    2.4 GTPBP4基因沉默抑制EGFR/PI3K/AKT信号通路激活
    2.5 GTPBP4基因沉默
    2.6 GTPBP4基因沉默介导EGFR/PI3K/AKT信号通路抑制胃癌细胞侵袭
    2.7 GTPBP4沉默可抑制EGFR/PI3K/AKT信号通路引起顺铂诱导的胃癌细胞凋亡
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]槲皮苷通过抑制PI3K/AKT信号通路诱导胃癌SGC7901细胞凋亡[J]. 陈龙云,柳叶.  中国病理生理杂志. 2018(11)
[2]PD-L1表达与胃癌发生发展的相关性Meta分析[J]. 钮佳宁,梁俏美,沈佳程,周雅茹,房嘉琪,陈子嫣,刘伟.  中国免疫学杂志. 2018(08)
[3]采用IP-XL/MS技术研究SGC7901胃癌细胞中EGFR信号通路动态变化[J]. 汲淑慧,王旖旎,汪宜,秦钧.  军事医学. 2018(04)
[4]RNAi沉默GTPBP4基因对结肠癌RKO细胞增殖及凋亡的影响[J]. 曾沁,刘勋,陈明,杨志惠.  肿瘤防治研究. 2017(01)
[5]GTP结合蛋白4在肝癌中的表达及作用的初步研究[J]. 刘茂生,郑燕,吴水梅,李腾政,钟思思,郭武华,谢正元.  中国肿瘤临床. 2016(24)
[6]PI3K/AKT/mTOR信号通路蛋白p-AKT及p-mTOR在胃癌组织中的表达及意义[J]. 张刚,郭剑,郝鑫,李萍,李杰.  临床与实验病理学杂志. 2016(10)



本文编号：3680635