烟草查尔酮异构酶基因2（NtCHI2）功能分析

发布时间：2022-11-04 21:13

　　烟草查尔酮异构酶（Chalcone isomerase,CHI）是黄酮类代谢的一个关键酶,烟草中有两个基因拷贝（NtCHI1、NtCHI2）,相关研究多集中在NtCHI1基因,对NtCHI2的研究较少。为研究烟草NtCHI2的功能,主要以NtCHI2的过表达和干扰植株叶片为材料,进行了实时定量PCR和CHI活性分析以及芸香苷含量检测,同时进行了NtCHI2体外表达蛋白的酶活分析。结果表明:NtCHI2体外表达蛋白具有查尔酮异构酶活性;过表达株系中NtCHI2的表达量升高5～75倍,但CHI酶活性和芸香苷含量基本没有变化;干扰株系中NtCHI2的表达量降至70%,CHI酶活性和芸香苷含量分别降低50%和90%。烟草NtCHI2参与芸香苷的合成代谢调控,在一定程度上NtCHI2基因的表达量和芸香苷的含量正相关。 

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料、试剂和仪器
        1.1.1 烟草材料
        1.1.2 试剂
        1.1.3 仪器
    1.2 方法
        1.2.1 烟草叶片RNA提取及c DNA制备
        1.2.2 实时荧光定量PCR(q PCR)
        1.2.3 烟草叶片总蛋白提取及定量
            1.2.3. 1 蛋白提取
            1.2.3. 2 蛋白定量
        1.2.4 查尔酮异构酶活性检测
        1.2.5 查尔酮异构酶体外表达活性检测
        1.2.6 芸香苷含量检测
2 结果与分析
    2.1 查尔酮异构酶基因过表达株系和干扰株系中Nt CHI2的表达量
    2.2 查尔酮异构酶基因过表达株系和干扰株系中CHI的活性
    2.3 体外表达查尔酮异构酶的活性
    2.4 查尔酮异构酶基因过表达株系和干扰株系中芸香苷含量
3 讨论
4 结论


【参考文献】：
期刊论文
[1]CiCHI提高拟南芥总黄酮含量[J]. 杨飞芸,白洁,刘坤,王瑞刚.  生物技术通报. 2019(11)
[2]玉溪、许昌烤烟烟叶中淀粉酶基因的表达及酶活性分析[J]. 翟妞,徐国云,郑庆霞,何声宝,张慧,刘萍萍,许亚龙,陈千思,王晨,周会娜.  烟草科技. 2019(09)
[3]高效液相色谱-三重四极杆质谱法同时测定烟叶中10种多酚类化合物[J]. 刘萍萍,卢紫舒,罗朝鹏,李泽锋,翟妞,郑庆霞,卢鹏,曹培健,周会娜,陈千思.  烟草科技. 2019(06)
[4]烟草慢阴离子通道蛋白基因NtSLAH1的克隆及表达分析[J]. 张慧,金立锋,徐国云,翟妞,刘萍萍,陈千思,郑庆霞,陈霞,周会娜.  烟草科技. 2018(03)
[5]不同生态区烤烟黄酮类物质代谢途径关键基因表达分析[J]. 贾宏昉,张洪映,张松涛,杨永霞,黄化刚,崔红.  河南农业科学. 2014(05)
[6]烟草黄酮类物质及其与品质的关系[J]. 李亚培,杨铁钊,申培林,尚晓颍.  浙江农业科学. 2010(06)
[7]植物查尔酮异构酶研究进展[J]. 李琳玲,程华,许锋,程水源.  生物技术通讯. 2008(06)

硕士论文
[1]烟草类黄酮合成相关转录因子的筛选及功能分析[D]. 王姗姗.中国烟草总公司郑州烟草研究院 2018



本文编号：3701344