OSBPL2基因缺陷型巴马小型猪肥胖相关特征的分析

发布时间：2022-11-06 10:31

　　目的:分析氧化固醇结合样蛋白2（oxysterol binding protein-like 2,OSBPL2）基因缺陷型巴马小型猪肥胖相关的表型特征和可能机制。方法:将3月龄野生型（wild type,WT）和OSBPL2缺陷型（mutant type,MT）巴马小型猪饲喂高脂饲料（high fat diet,HFD）。喂食9个月后检测体重、皮下脂肪厚度,HE染色观察肝脏脂肪变性,电镜观察肝脏组织亚细胞结构,检测血清甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶等生化指标,实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测肝脏脂肪合成分化相关基因的变化,Western blot及免疫组织化学法检测脂肪酸结合蛋白4（adipocyte fatty acid binding protein 4,FABP4）及酰基辅酶A氧化酶1（acylcoenzyme A oxidase 1,ACOX1）蛋白表达水平。结果:MT-HFD组体重、皮下脂肪厚度明显高于WT-HFD组（P＜0.05）;HE染色结果显示,MT-HFD组脂肪细胞显著增大（P＜0.001）... 

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【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 组织标本采集
        1.2.2 HE染色和免疫组化染色
        1.2.3 血脂生化检测
        1.2.4 电镜观察以及MAM长度的计算
        1.2.5 实时定量PCR
        1.2.6 蛋白质免疫印迹
    1.3 统计学方法
2 结果
    2.1 同月龄巴马小型猪体重及皮下脂肪检测
    2.2 同月龄巴马小型猪皮下脂肪细胞面积的比较
    2.3 同月龄巴马小型猪血脂分析
    2.4 同月龄巴马小型猪肝组织结构及肝功能生化分析
    2.5 电镜下同月龄巴马小型猪肝细胞MAM比较
    2.6 巴马小型猪肝细胞中脂肪合成代谢相关基因的表达检测
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]OSBPL2-disrupted pigs recapitulate dual features of human hearing loss and hypercholesterolaemia[J]. Jun Yao,Huasha Zeng,Min Zhanga,Qinjun Wei,Ying Wang,Haiyuan Yang,Yajie Lu,Rongfeng Li,Qiang Xiong,Lining Zhang,Zhibin Chen,Guangqian Xing,Xin Cao,Yifan Dai.  Journal of Genetics and Genomics. 2019(08)
[2]FABP4通过上调GLUT1表达和有氧糖酵解促进肠癌细胞侵袭转移[J]. 王克强,戴文鹏,黄湖南,车河龙,邓小荣.  南京医科大学学报(自然科学版). 2019(02)
[3]人/猪OSBPL2同源性比较及猪PFFs靶基因敲除细胞系的建立[J]. 曾华沙,姚俊,王红顺,王盈,杨海元,曹新,戴一凡.  南京医科大学学报(自然科学版). 2018(02)
[4]基于CRISPR/Cas9技术建立敲除OSBPL2基因的HeLa细胞株[J]. 陈庆,鲁雅洁,姚俊,魏钦俊,曹新.  南京医科大学学报(自然科学版). 2016(09)
[5]B超活体测定猪背膘厚和眼肌面积的研究[J]. 王重龙,陶立,张勤,张东红,李庆岗,刘卫东.  安徽农业科学. 2005(03)



本文编号：3703344