肝细胞特异性HuR基因敲除小鼠模型的表型研究

发布时间：2022-12-05 20:37

　　目的探讨肝细胞特异性敲除HuR基因对小鼠肝脏功能的影响。方法从美国Jackson实验室引进LoxP标记的人抗原R（human antigen R,HuR）基因小鼠(HuR^fl/fl)和Alb-Cre转基因小鼠。杂交后,经数代选育配种,建立肝细胞特异性HuR基因敲除小鼠(HuR^LKO)模型。PCR技术鉴别小鼠基因型,蛋白免疫印迹和免疫荧光实验检验小鼠肝脏的HuR表达水平,同时HE染色观察肝脏结构变化。高脂喂养HuR^fl/fl/Alb-Cre和HuR^fl/fl两组小鼠,观察小鼠体重、肝重和肝体比变化,提取血清检测肝脏损伤和脂肪代谢相关指标。结果 PCR成功检测筛选子代小鼠基因型,包括HuR^fl/fl/Alb-Cre和HuR^fl/fl小鼠。蛋白免疫印迹实验和免疫荧光实验证明小鼠肝细胞特异性HuR基因敲除成功。HE染色结果提示HuR^LKO小鼠的肝细胞出现变性水肿、局部坏死。高脂喂养实验提示两组小鼠在肝重、肝体比、AST、ALT、HDL-C、血... 

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【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 实验动物
    1.2 主要试剂
    1.3 方法
        1.3.1 肝细胞HuR基因特异性敲除小鼠模型的构建:
        1.3.2 小鼠基因型检测:
        1.3.3 小鼠HuR蛋白水平检测:
        1.3.4 小鼠肝脏免疫荧光实验:
        1.3.5 小鼠肝脏石蜡切片及HE染色:
        1.3.6 高脂喂养后小鼠血脂和肝功能检测:
    1.4 统计学分析
2 结果
    2.1 通过基因型筛选获得HuRfl/fl/Alb-Cre小鼠
    2.2 验证小鼠肝细胞HuR敲除水平
    2.3 小鼠肝细胞HE染色镜下结构
    2.4 小鼠高脂喂养后的情况
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]Adaptive and maladaptive expression of the mRNA regulatory protein HuR[J]. Suman Govindaraju,Beth S Lee.  World Journal of Biological Chemistry. 2013(04)



本文编号：3710312