利用CRISPR/Cas9系统编辑拟南芥ILR3基因及功能验证

发布时间：2022-12-06 21:17

　　拟南芥转录因子ILR3（IAA-Leucine Resistant 3）在铁稳态的调节、葡萄糖异硫氰酸盐（glucosinolate,简称GLS）的生物合成和病原体响应方面起到重要作用。为更深入探索该转录因子在植物体内的更多功能,利用YAO基因启动子驱动Cas9在拟南芥中表达,成功获得ILR3基因编辑突变体。测序结果及序列分析结果表明,在ILR3编辑拟南芥中,该基因编码区发生了碱基缺失或插入,导致蛋白ILR3保守结构域丢失。并且,这些基因编辑突变体T2代幼苗与T-DNA插入突变体ilr3-2在缺铁环境下表现出相同的性状,进一步验证ILR3转录因子在植物对铁的吸收及体内平衡的作用,也为深入研究其更多生物学功能奠定了工作基础。 

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 拟南芥AtILR3编辑靶位点的确定
    1.3 gRNA的合成及与载体的连接
    1.4 拟南芥遗传转化及基因编辑植株的获得
    1.5 AtILR3编辑拟南芥的表型分析
2 结果与分析
    2.1 AtILR3编辑靶位点的筛选及载体构建
    2.2 拟南芥基因编辑植株的获得及鉴定
    2.3 AtILR3编辑拟南芥的表型
3 讨论



本文编号：3711647