高糖高脂微环境中NFKB1基因缺失突变调控线粒体分裂增加内皮细胞凋亡

发布时间：2022-12-06 23:42

　　目的探讨B细胞κ轻肽基因增强子核因子1（NFKB1）基因启动子区-94位点ATTG插入/缺失突变对高糖高脂微环境诱导人脐静脉内皮细胞（HUVEC）损伤的影响及其潜在机制。方法建立NFKB1不同基因型原代HUVEC细胞的高糖高脂模型,采用Annexin-V-FLUOS染色检测细胞凋亡,Mito Tracker染色后通过激光共聚焦显微镜观察线粒体形态,Western blot检测核因子κB（NF-κB）信号通路中p50、p65蛋白,线粒体分裂相关蛋白Drp1、Drp1-s637、Drp1-s616和Fis1,线粒体融合相关蛋白Mfn1、Mfn2和Opa1,以及凋亡相关蛋白细胞色素C（CytC）。结果高糖高脂诱导原代HUVEC凋亡显著增加,与Ⅱ型细胞相比,DD型细胞凋亡指数更高;线粒体过度分裂成碎片状;DD型细胞中NF-κB通路中关键蛋白p50表达明显降低,线粒体融合相关蛋白Mfn2表达降低,线粒体分裂动力相关蛋白Drp1-s616磷酸化增加,CytC表达增加。结论 NFKB1基因缺失突变可能是DD型HUVEC更容易受到高糖高脂微环境损伤的重要原因,其潜在的机制可能与线粒体过度分裂相关。 

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 材料和试剂
    1.2 原代HUVEC高糖高脂模型建立和实验分组
    1.3 Annexin-V-FLUOS检测不同基因型HUVEC凋亡
    1.4 Mito Tracker染色检测线粒体形态
    1.5 Western blot法检测相关蛋白
    1.6 统计学方法
2 结 果
    2.1 高糖高脂诱导DD型细胞凋亡指数显著高于Ⅱ型细胞
    2.2 高糖高脂诱导DD型细胞线粒体过度分裂成碎片状
    2.3 高糖高脂对不同NFKB1基因型细胞中NF-κB信号通路、线粒体融合与分裂及凋亡相关蛋白表达的影响
3 讨 论


【参考文献】：
期刊论文
[1]内皮细胞损伤与修复的研究进展[J]. 饶璇,李元建.  中国动脉硬化杂志. 2017(05)
[2]巴西苏木素调控自噬对高糖诱导血管内皮细胞损伤的影响[J]. 刘婷,佟晓哲.  中国动脉硬化杂志. 2017(04)
[3]原代脐静脉内皮细胞NFKB1基因启动子区缺失型较插入型P50蛋白表达降低[J]. 周韵,杜冬梅,罗俊一,李芳,古丽那孜·穆哈提,陈小翠,马依彤,杨毅宁.  细胞与分子免疫学杂志. 2016(03)
[4]Genetics of coronary artery disease and myocardial infarction[J]. Xuming Dai,Szymon Wiernek,James P Evans,Marschall S Runge.  World Journal of Cardiology. 2016(01)



本文编号：3711839