应用多重PCR及第二代测序技术建立乳腺癌易感基因（BRCA1/2）突变检测平台

发布时间：2022-12-10 17:10

　　背景：人类乳腺癌易感基因BRCA1/2与遗传性乳腺癌/卵巢癌发病密切相关。乳腺癌、卵巢癌近年来发病率、病死率逐年增高,遗传性乳腺癌、卵巢癌患者中约存在60%-70%以及80%-90%的机率携带BRCA1/2基因突变,携带该基因致病性突变的患者终身发生乳腺癌、卵巢癌的累计风险较正常人显著提高。伴随着高通量测序技术的兴起,BRCA1/2基因诊断方法得到进一步发展,能够实现高通量、快速、准确且检测成本较一代测序显著降低。多重PCR技术可准确的完成基因信号扩增,与二代测序技术相结合,为BRCA1/2基因检测提供更加高精准度、快速简易的检测方法。目的：建立基于多重PCR及高通量测序技术的平台用于检测BRCA1/2基因全部外显子序列以及外显子内含子拼接区突变,并验证其敏感度及特异度。方法：1,构建扩增BRCA1/2基因全部外显子序列以及外显子内含子拼接区的多重PCR技术,并通过二代测序技术平台对多重PCR后建立的BRCA1/2基因文库进行测序。以北京大学肿瘤医院5名经一代测序技术检测具有明确致病突变位点的患者为研究对象,通过与一代测序、目标序列捕获测序结果进行比对,对该方法进行验证。2,收集中国人... 

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
英文缩略词表
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 构建扩增BRCA1/2基因全外显子序列的多重PCR技术
    引言
    1. 材料和方法
    2. 结果
    3. 讨论
    4. 小结
第二部分 建立检测BRCA1/2基因突变的mPCR-NGS测序平台
    引言
    1. 材料和方法
    2. 结果
    3. 讨论
    4. 小结
第三部分 应用mPCR-NGS技术对BRCA1/2基因突变高危人群进行测序
    引言
    1. 材料和方法
    2. 结果
    3. 讨论
    4. 小结
结论
参考文献
综述：乳腺癌易感基因(BRCA1/2)突变的植入前遗传学诊断研究进展
    参考文献
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致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]乳腺癌相关基因（BRCA1）与新辅助化疗敏感度研究[J]. 张勇,叶俊松.  医学研究杂志. 2014(12)
[2]利用Agilent定制基因芯片筛选相同病理类型、不同预后的早期乳腺癌的分子标记物[J]. 厉周,彭亮,韩帅,黄宗海,史福军,蔡寨,李秀勤,张普生,朱卉娟,金维荣.  南方医科大学学报. 2013(10)
[3]美国30年来乳腺X线摄像筛查对乳腺癌发病率的影响[J]. 罗勇.  临床误诊误治. 2013(06)
[4]高通量测序技术的最新研究进展[J]. 刘英华,陈瑛.  中国妇幼保健. 2013(12)
[5]家族性乳腺癌BRCA1、2基因突变检测及临床应用[J]. 解云涛.  中国实用外科杂志. 2013(03)
[6]BRCA1和BRCA2基因外显率研究概况[J]. 杨晓晨,胡震.  中华临床医师杂志(电子版). 2013(03)
[7]乳腺癌与BRCA1及BRCA2基因相关性研究进展[J]. 马金柱.  内蒙古医学杂志. 2012(10)
[8]新一代测序技术的研究进展[J]. 韦贵将,邹秉杰,陈之遥,宋沁馨,李佑志,周国华.  现代生物医学进展. 2012(19)
[9]遗传性乳腺癌卵巢癌综合征的筛查与治疗研究进展[J]. 杨彩虹,崔恒.  妇产与遗传(电子版). 2012(01)
[10]一种结合单张芯片序列捕获和高通量测序技术测序外显子组的方法[J]. 蒋涛,杨蕾,蒋慧,田埂,张秀清.  中国科学:生命科学. 2011(09)

博士论文
[1]高危家族卵巢癌和散发性卵巢癌患者BRCA1/2基因突变的研究及临床意义探讨[D]. 陶陶.中国协和医科大学 2010



本文编号：3717172