CDA基因沉默对人慢性髓系白血病细胞增殖和凋亡的影响

发布时间：2022-12-11 14:56

　　目的:探讨胞苷脱氨酶（CDA）基因沉默在治疗人慢性髓系白血病（CML）中的潜在价值。方法:通过RT-PCR和Western blot检测CML患者和造血干细胞移植供体的骨髓单个核细胞中的CDA表达。对CML KCL-22细胞系转染shRNA和过表达CDA的p BS/U6-Neo质粒来诱导CDA基因沉默或过表达。通过细胞计数试剂盒8（CCK-8）测定和细胞集落形成实验评价细胞增殖,通过流式细胞仪检测细胞凋亡。此外,将0.2 m L不同处理的细胞悬浮液（106个细胞/m L）注射到裸鼠中建立裸鼠肿瘤异种移植模型。结果:与造血干细胞移植供体相比,CML患者的骨髓单个核细胞中的CDA m RNA和蛋白表达显著升高（P ＜0.05）。转染shRNA-CDA显著降低了KCL-22细胞的细胞活力和细胞集落数（P＜0.05）。与对照组（4.32%）相比,shRNA-CDA组（13.45%）的细胞凋亡率显著升高（P＜0.05）。与对照组相比,shRNA-CDA组的BCL-2蛋白表达水平显著降低,而cleaved caspase-3显著升高（P＜0.05）。与对照组相比,shRNA-CDA组的PI3K蛋白... 

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
前言
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 细胞培养
        1.2.2 CDA基因沉默和CDA过表达模型的构建
        1.2.3 细胞转染
        1.2.4 细胞活力测定
        1.2.5细胞集落形成实验
        1.2.6 细胞凋亡测定
        1.2.7 RT-PCR
        1.2.8 蛋白质印迹分析
        1.2.9 裸鼠肿瘤异种移植
    1.3 统计分析
2 结果
    2.1 CML患者的骨髓单个核细胞中CDA m RNA和蛋白表达升高
    2.2 CDA基因沉默抑制细胞增殖
    2.3 CDA基因沉默诱导细胞凋亡
    2.4 CDA基因沉默通过抑制PI3K/Akt信号通路发挥抗癌作用
    2.5 CDA基因沉默抑制肿瘤生长
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3718989