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稻纵卷叶螟气味降解酶与茶尺蠖感觉神经元膜蛋白基因鉴定及表达谱分析

发布时间:2022-12-17 11:18
  昆虫在长期的进化过程中形成了一套高度发达的嗅觉系统,嗅觉是昆虫与外界进行信息交流的主要方式。在嗅觉过程中,昆虫通过其嗅觉器官表面各种类型的嗅觉感器去感受环境中的挥发性物质,进而产生相应的生理或行为反应,如取食、寻找配偶、产卵、躲避天敌等。昆虫对气味分子的识别过程十分复杂,研究证实有多种蛋白参与其中,如气味结合蛋白(Odorant-binding proteins,OBPs)、化学感受蛋白(chemosensory proteins,CSPs)、气味受体(Odorant receptors,ORs)、离子型受体(ionotropic receptors,IRs)、感觉神经元蛋白(sensory neuron membrane proteins,SNMPs)和气味降解酶(odorant-degrading enzymes,ODEs)等。近年来,由于化学农药的过量使用,农药残留和害虫抗药性成为了越来越不容忽视的问题,因此对昆虫的化学感受机制进行研究,详细阐明气味降解酶及感觉神经元膜蛋白的表达情况,能为基于昆虫嗅觉识别机制的新型行为调控技术提供理论支持。本研究以两种重要农业害虫稻纵卷叶螟(Cn... 

【文章页数】:72 页

【学位级别】:硕士

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致谢
摘要
Abstract
1 文献综述
    1.1 昆虫的触角
        1.1.1 昆虫触角及分类
        1.1.2 昆虫触角感器
        1.1.3 昆虫触角感受气味分子的机制
    1.2 昆虫感觉神经元膜蛋白研究进展
    1.3 昆虫气味降解酶研究进展
        1.3.1 昆虫触角羧酸酯酶研究进展
        1.3.2 昆虫醛氧化酶研究进展
        1.3.3 昆虫谷胱甘肽转移酶研究进展
        1.3.4 昆虫细胞色素P450氧化酶研究进展
2 引言
3 稻纵卷叶螟气味降解酶基因鉴定、序列及进化关系分析
    3.1 材料与方法
        3.1.1 供试昆虫
        3.1.2 主要试剂及仪器设备
        3.1.3 昆虫总RNA的提取
        3.1.4 转录组测序、拼接及嗅觉基因注释
        3.1.5 稻纵卷叶螟羧酸酯酶和醛氧化酶基因系统发育分析
    3.2 结果与分析
        3.2.1 稻纵卷叶螟触角羧酸酯酶基因的鉴定及系统发育分析
        3.2.2 稻纵卷叶螟醛氧化酶基因的鉴定及系统发育分析
    3.3 讨论
4 稻纵卷叶螟气味降解酶基因表达谱分析
    4.1 材料与方法
        4.1.1 供试昆虫
        4.1.2 主要试剂及仪器设备
        4.1.3 昆虫总RNA的提取
        4.1.4 实时荧光定量PCR
    4.2 结果与分析
    4.3 讨论
5 茶尺蠖感觉神经元膜蛋白基因鉴定、系统进化和表达谱分析
    5.1 材料方法
        5.1.1 昆虫的饲养和组织准备
        5.1.2 主要试剂及仪器设备
        5.1.3 昆虫总RNA的提取
        5.1.4 转录组测序、拼接及嗅觉基因注释
        5.1.5 茶尺蠖感觉神经元膜蛋白基因系统发育分析
        5.1.6 茶尺蠖感觉神经元膜蛋白基因表达谱分析
    5.2 结果与分析
        5.2.1 茶尺蠖EoblSNMPs基因鉴定
        5.2.2 茶尺蠖EoblSNMP基因系统发育分析
        5.2.3 茶尺蠖EoblSNMP基因表达谱分析
    5.3 讨论
6 茶尺蠖触角感器扫描电镜观察
    6.1 材料与方法
        6.1.1 供试昆虫及饲养条件
        6.1.2 扫描电镜观察两种尺蠖触角感器类型
        6.1.3 触角感器的鉴定和命名
    6.2 结果与分析
        6.2.1 毛形感器(sensilla trichodea)
        6.2.2 锥形感器(sensilla basiconca)
        6.2.3 刺形感器(sensilla chaetic)
        6.2.4 栓锥形感器(sensilla styloconica)
        6.2.5 鳞形感器(sensilla squamiformiz)
        6.2.6 耳形感器(Sensilla auricilica)
        6.2.7 Bohm氏鬃毛(Bhm bristles)
    6.3 讨论
7 茶尺蠖感觉神经元膜蛋白基因触角感器表达定位
    7.1 材料与方法
        7.1.1 供试昆虫的饲养与收集
        7.1.2 主要试剂及仪器
        7.1.3 RNA提取及第一链DNA制备
        7.1.4 RNA探针合成
        7.1.5 原位杂交
    7.2 结果与分析
        7.2.1 茶尺蠖感觉神经元膜蛋白基因在触角感器上的表达定位
        7.2.2 EoblSNMP1和EoblSNMP2在茶尺蠖雄虫触角感器上的共表达
    7.3 讨论
全文总结
参考文献
作者简介


【参考文献】:
期刊论文
[1]稻纵卷叶螟羧酸酯酶基因的鉴定与表达谱分析[J]. 刘苏,冯明峰,何梦竹.  应用昆虫学报. 2015(03)
[2]茶尺蠖性行为习性初报[J]. 杨云秋,宛晓春,郑高云,高旭晖.  中国农学通报. 2008(02)
[3]昆虫的触角感器[J]. 马瑞燕,杜家纬.  昆虫知识. 2000(03)
[4]棉铃虫雄蛾触角的毛形感器对其性信息素组分及类似物的反应[J]. 吴才宏.  昆虫学报. 1993(04)

博士论文
[1]茶尺蠖化学感受相关基因的克隆与功能研究[D]. 马龙.中国农业科学院 2016



本文编号:3719836

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