玉米ZmbHLH161基因的克隆及功能研究

发布时间：2023-01-26 07:47

　　bHLH转录因子是植物第二大转录因子家族,在调节植物生长发育、信号转导和逆境胁迫响应等方面发挥着重要的作用。为了研究玉米bHLH家族基因在逆境胁迫响应中的功能,本研究从玉米根组织中克隆了ZmbHLH161（AC:NC_AQK75074）基因。生物信息学分析表明:该基因包含3个外显子, cDNA全长1460 bp,编码序列全长1059 bp,编码352个氨基酸;在玉米基因组中以单拷贝形式存在,功能未知;ZmbHLH161蛋白分子量为37.1kD,理论等电点为6.10,具有bHLH转录因子家族特有的保守结构域,但不具跨膜结构,无信号肽,为亲水性蛋白,蛋白二级结构无规则卷曲所占比例最大,为42.05%。玉米原生质体瞬时表达试验表明,ZmbHLH161定位在细胞核内。实时荧光定量PCR（qPCR）分析表明,正常生长条件下,ZmbHLH161主要在根系和幼胚中表达;在脱水和干旱处理下,ZmbHLH161在玉米苗期叶片中上调表达。转基因异源表达ZmbHLH161拟南芥株系经不同浓度NaCl处理后,其根长与野生型差异不显著,而不同浓度甘露醇处理后其根长优于野生型。由此推测ZmbH... 

【文章页数】：9 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 植物材料及试剂
    1.2 Zmb HLH161 c DNA的克隆及生物信息学分析
        1.2.1 植物表达载体p YBA1132:Zmb HLH161:EGFP的构建
        1.2.2 玉米原生质体的提取及转化
    1.3 玉米Zmb HLH161基因表达模式分析
    1.4 植物异源表达载体p YBA1132:Zmb HLH161的构建及拟南芥遗传转化
        1.4.1 异源表达载体构建
        1.4.2 转化农杆菌GV3101及侵染拟南芥
        1.4.3 转基因拟南芥种子逆境处理
2 结果与分析
    2.1 玉米转录因子基因Zmb HLH161序列扩增与生物信息学分析
    2.2 亚细胞定位结果与分析
    2.3 玉米Zmb HLH161在不同组织中的表达情况
    2.4 不同逆境处理对叶片和根中Zmb HLH161表达的影响
    2.5 转基因拟南芥阳性植株鉴定
    2.6 转基因拟南芥的耐盐性分析
    2.7 转基因拟南芥的耐甘露醇分析
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]我国玉米种业转型升级的路径与策略探讨[J]. 刘天金,王玉玺,宁明宇,靖飞,董晓霞,王志敏,刘春青.  中国种业. 2018(02)
[2]玉米ZmSAMS1基因在盐、干旱等逆境胁迫下的表达分析[J]. 余爱丽,赵晋锋,王高鸿,杜艳伟,李颜方,张正.  玉米科学. 2016(03)
[3]转录因子概述[J]. 张艳馥,沙伟.  生物学教学. 2009(10)
[4]转录因子在植物抗逆性上的应用研究[J]. 罗赛男,杨国顺,石雪晖,卢向阳,徐萍.  湖南农业大学学报(自然科学版). 2005(02)



本文编号：3732322