RNA干扰HOXA10基因联合中药对K562/ADM细胞多药耐药影响及其机制的探讨

发布时间：2023-02-06 20:28

　　目的:本实验利用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术靶向沉默HOXA10基因,研究靶向沉默HOXA10基因联合中药川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对K562/ADM细胞多药耐药的影响以及机制的探讨,为临床逆转白血病多药耐药提供坚实的实验依据。方法:1、根据筛选出的HOXA10 siRNA构建特异性pGPHI/GFP/Neo-HOXA10 shRNA,应用酶切电泳法、测序法进行重组质粒载体测定,重组质粒稳定转染K562/ADM 细胞,RT-PCR、Western blotting 检测 HOXA10 mRNA 及 HOXA10蛋白表达水平的变化。沉默HOXA10基因后,MTT、FCM分别测定逆转耐药倍数、胞内阿霉素(Adriamycin,Adr)平均荧光强度(mean fluorescence intensity, MFI),Western blotting 检测 P-gp、MRP1 蛋白表达量的变化。2、TMP处理K562/ADM细胞,MTT检测TMP逆转耐药倍数,FCM检测胞内Adr MFI,Western blotting检测TMP对...

【文章页数】：61 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
英文摘要
中英文词汇对照表
引言
第一部分 靶向沉默HOXA10基因对K562/ADM细胞MDR的影响
    材料
    方法
    结果
    讨论
第二部分 中药TMP对K562/ADM细胞MDR的影响
    材料
    方法
    结果
    讨论
第三部分 靶向沉默HOXA10基因联合TMP对K562/ADM细胞多药耐药的影响以及机制的探讨
    材料
    方法
    结果
    讨论
全文总结
结论
参考文献
综述
    参考文献
攻读硕士期间发表的文章和获奖
致谢



本文编号：3736556