玉米光合基因ZmRbcS1的亚细胞定位及启动子活性分析

发布时间：2023-03-04 22:44

　　1,5二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(1,5 ribulose bisphosphate carboxylase/oxygenase, Rubisco)为绿色植物光合碳同化的关键酶,其结构上的小亚基(Rubisco small subuni, RbcS)影响着Rubisco全酶的功能。本实验以玉米(Zea mays)自交系B73为材料,首先对叶片进行DNA和RNA的提取,扩增ZmRbcS1基因(GenBank No. 542212)的启动子序列并进行结构分析,同时对该基因的ORF进行扩增及载体构建,并进行亚细胞定位;通过PlantCARE数据库对启动子进行分析,发现该启动子序列上除大量保守光调控元件外(如G-box、GATA-motif、I-box、RbcS-CMA7c等),还含有多种应答干旱、激素等逆境因子的保守顺式作用元件(如干旱诱导响应元件(drought-induced response element, MBS)、赤霉素响应元件(gibberellinresponsive element, P-box)、茉莉酸响应元件(jasmonic acid response element...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料和菌种
    1.2 总RNA提取、c DNA合成、基因克隆及亚细胞定位
    1.3 DNA的提取及Zm Rbc S1启动子扩增
    1.4 序列分析
    1.5 载体的构建及农杆菌介导的转化
    1.6 GUS染色及活性分析
2 结果与分析
    2.1 玉米Zm Rbc S1基因亚细胞定位载体的构建和鉴定
    2.2 转基因烟草叶片的激光共聚焦显微镜观察
    2.3 Zm Rbc S1基因启动子的分离及序列分析
    2.4 植物表达载体的构建
    2.5 启动子活性的检测
3 讨论
4 结论



本文编号：3755156