利用CRISPR/Cas9技术敲除MDA-MB-231乳腺癌细胞株NODAL基因的研究

发布时间：2023-03-13 19:04

　　目的:乳腺癌在女性中发病率排第一位,死亡率居第二位,且我国乳腺癌发病率还呈逐年增加趋势。因此,对乳腺癌发病机制的研究显得尤其重要。NODAL蛋白是一种细胞因子,主要在维持胚胎干细胞不分化、形成内脏器官左右不对称等过程中发挥重要作用。NODAL分子作为胚胎蛋白,一般在正常组织细胞中不表达,最近研究发现在肿瘤细胞中NODAL蛋白高表达,可能与肿瘤的发生和发展密切相关。但是,目前对NODAL分子促肿瘤作用的详细分子机制并不十分清楚。本研究希望利用CRISPR/Cas9基因编辑技术定点敲除三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231的NODAL基因,以构建敲除NODAL基因的细胞模型,为进一步揭示NODAL基因在乳腺癌细胞中发挥作用的分子机制奠定基础。此外,还希望通过本研究搭建基因编辑技术平台。方法:1.设计敲除方案根据相关文献和预实验结果确定基因敲除的靶细胞,然后通过生物信息学方法分析NODAL基因的结构特点,确定NODAL基因敲除的靶位点。本研究制定了两套敲除NODAL基因的方案,方案A希望将NODAL基因的3个外显子全部敲除,方案B仅敲除NODAL基因的第二外显子。2.构建Cas9/sgRNA...

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【学位级别】：硕士

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中文摘要
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前言
材料与方法
实验结果
讨论
结论
参考文献
中英文缩写对照
致谢
综述 Crispr/cas9基因编辑技术在乳腺癌研究中的应用进展
    参考文献



本文编号：3762206