香茅草单萜合成酶基因的克

发布时间：2023-03-13 21:00

　　植物资源的综合应用是目前的研究热点,开发具有经济价值的植物源产品在现在市场上尤为迫切。大多数植物的次生代谢产物主要有萜类、生物碱、苯丙烷类等,植物次生代谢产物对植物本身和人类有着极其重要作用。对于植物,产生次生代谢产物是面对恶劣环境下保护自身的手段;而对于我们人类而言,很多植物次生代谢产物具有治疗疾病的重要功效,也是医药品和化妆品的重要来源。其中,萜类化合物是植物次生代谢产物中最多样化的天然代谢产物,具有重要的药理作用和广泛的生物学功能。因而,阐明萜类化合物在植物中的生物合成途径,研究其分子调控机制有着重要的意义。香茅(Cymbopogon citratus)具有栽培容易、易于管理、投资小、见效快等优点,易于发展大规模种植。其茎叶提取的精油在食物、防腐、医药等领域有着广泛的应用。有研究证实,香茅草精油中主要成分为萜类化合物,其药理作用主要包括抗菌、消炎、止痛、抗氧化、抑制肿瘤、抗焦虑、降低血糖及降压等。以往对香茅草的研究主要集中在其精油的提取和成分分析,对其重要化合物的生物合成及代谢调控的研究相对较少,基因组中大多数基因的功能仍不清楚,因此无法调控其特有的合成途径从而大幅度提高其产物的...

【文章页数】：46 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
第一章 绪论
    1.1 前言
    1.2 香茅草研究概述
    1.3 萜类化合物及其功能
        1.3.1 萜类化合物
        1.3.2 萜类化合物的功能
    1.4 .萜类生物合成途径
    1.5 萜类合成酶的研究概况
        1.5.1 萜类合成酶的结构与功能
        1.5.2 萜类合成酶的进化和分类
        1.5.3 萜类合成酶基因的克隆及研究进展
    1.6 课题研究内容、研究目的及意义
        1.6.1 主要研究内容
        1.6.2 研究目的及意义
第二章 材料与方法
    2.1 引言
    2.2 实验材料
        2.2.1 植物材料
        2.2.2 主要试剂及器材
        2.2.3 质粒与菌株:
    2.3 香茅草单萜合成酶基因的克隆
        2.3.1 .香茅草总RNA的提取
        2.3.2 RNA质量检测
        2.3.3 cDNA文库构建—RNA反转录
        2.3.4 引物设计
        2.3.5 目的基因片段的获取
        2.3.6 蛋白的亲疏水性分析[69-70]
    2.4 原核表达体系的建立和优化
        2.4.1 原核表达载体构建
        2.4.2 表达载体和目的基因的连接
        2.4.3 目的蛋白的原核表达
        2.4.4 聚丙烯凝胶电泳(SDS-PAGE)检测
    2.5 表达蛋白的纯化
        2.5.1 蛋白的提取与纯化
第三章 结果与分析
    3.1 .总RNA电泳检测结果
    3.2 目的片段获取与鉴定
    3.3 编码蛋白的亲疏水性分析
    3.4 目的蛋白的SDS-PAGE检测结果
    3.5 蛋白纯化SDS-PAGE检测
    3.6 本章小结
第四章 总结与展望
    4.1 总结
    4.2 展望
参考文献
致谢



本文编号：3762381