RNA沉默ERp29基因促进人前列腺癌细胞体外侵袭及其机制研究

发布时间：2023-03-19 00:26

　　目的:对内质网分子伴侣29 (ERp29)与前列腺癌患者的临床病理特征相关性进行综合分析以及RNA干扰ERp29基因对LNCaP前列腺癌细胞株侵袭的影响及其机制。方法:通过免疫组化法检测良性前列腺增生组织和前列腺癌组织中ERp29的表达,通过Western印迹方法检测6例前列腺癌组织以及临近正常组织中ERp29蛋白的差异性;通过脂质体转染法将特异性沉默ERp29基因的siRNA转染人LNCaP细胞;分别用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)和Western印迹方法检测ERp29 siRNA对LNCaP细胞ERp29基因和蛋白表达的抑制作用;运用MTT法检测LNCaP细胞的增殖活力;利用Transwell法检测细胞体外迁移及侵袭能力;通过qRT-PCR法检测上皮-间质转化相关标志物变化。结果:前列腺癌中ERp29的高表达阳性率低于非肿瘤前列腺组织(73.9%vs 91.9%,P<0.05);前列腺癌组织中的ERp29低表达阳性率与M分期显著相关(P<0.05)。LNCaP细胞转染ERp29 siRNA后,其细胞增殖能力显著增强,迁移和侵袭能力也显著提高,差异有统计学意义(P...

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【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 主要试剂
    1.2 细胞及细胞培养
    1.3 一般资料
    1.4 免疫组化法
    1.5 细胞转染
    1.6 MTT
    1.7 Transwell侵袭与迁移实验
        1.7.1 Transwell侵袭实验
        1.7.2 Transwell迁移实验
    1.8 qRT-PCR LNCaP细胞转染
    1.9 Western 印迹实验
    1.10 统计学分析
2 结果
    2.1 ERp29在PCa组织和细胞株中下调
    2.2 ERp29表达水平与PCa患者的转移相关
    2.3 靶向ERp29的siRNA对PCa细胞株LNCaP的影响
    2.4 靶向ERp29的siRNA对LNCaP细胞株EMT的影响
3 讨论



本文编号：3764168