转基因水稻中CP4-EPSPS蛋白质的检测及其表达特征研究

发布时间：2023-04-05 15:37

　　为了建立转基因水稻中CP4-EPSPS蛋白质的免疫学检测方法,并了解其在水稻生长过程中的表达特征,本研究在大肠杆菌中表达了CP4-EPSPS蛋白质,纯化后以其为免疫原免疫小鼠,经筛选获得了可识别CP4-EPSPS的单克隆抗体。建立了用免疫印记技术检测转基因水稻中CP4-EPSPS蛋白质的方法,该方法可以从单粒稻米的0.63%材料中检测到CP4-EPSPS信号。对水稻不同发育时期代表性组织的检测结果表明,CP4-EPSPS蛋白质呈组成型表达,在花药、穗轴、颖壳及不同时期的叶片中的表达量较高,但在分蘖期基部茎节、叶鞘及成熟期种子胚中的表达量稍低。本研究建立的免疫学方法在转基因水稻检测中具有潜在的应用价值。

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 Cp4-epsps基因的克隆
    1.3 CP4-EPSPS蛋白质的表达与纯化
    1.4 抗CP4-EPSPS抗体的制备及特异性检测
    1.5 水稻总蛋白质提取
    1.6 免疫印记分析(Western blot,WB)
2 结果与分析
    2.1 Cp4-epsps基因的克隆
    2.2 CP4-EPSPS蛋白质的表达及抗体制备
    2.3 转基因水稻稻米中CP4-EPSPS蛋白质的检测
    2.4 转基因水稻幼苗期CP4-EPSPS蛋白质的表达特征
    2.5 转基因水稻成株期CP4-EPSPS蛋白质的表达特征
3 讨论
4 结论



本文编号：3783671