HNF4A充当肿瘤抑制基因抑制结直肠肿瘤进展的实验

发布时间：2023-04-25 23:02

　　目的探究HNF4A在结直肠肿瘤进展中的作用。方法构建HNF4A过表达或敲除的结直肠癌细胞系,通过实时定量PCR和Western blot检测构建的细胞系HNF4A的表达水平;通过软琼脂及平板克隆形成实验检测细胞系的克隆形成能力,CCK-8法检测细胞的增殖能力;Western blot检测干细胞标志物的表达水平;最后通过Transwell迁移与侵袭实验检测细胞的迁移侵袭能力,R2基因分析平台分析结直肠癌中HNF4A与基质金属蛋白酶MMP2及MMP9表达的相关性并通过Western blot验证。结果过表达HNF4A抑制了结直肠肿瘤细胞的增殖与克隆形成能力及迁移侵袭能力,敲低HNF4A促进了结直肠癌细胞的增殖与克隆能力及迁移侵袭能力,Western blot显示HNF4A抑制了结直肠癌干细胞的标志物CD133、CD44及EpCAM的表达和基质金属蛋白酶MMP2及MMP9的表达,在HNF4A敲低的细胞系中得出了同样的结论。结论 HNF4A通过抑制结直肠癌干细胞特征及金属蛋白酶的表达来抑制结直肠肿瘤的进展。

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
0 引言
1 材料及方法
    1.1 细胞及培养
    1.2 试剂
    1.3 慢病毒转染
    1.4 实时定量PCR(qPCR)
    1.5 克隆形成实验
    1.6 CCK-8实验
    1.7 迁移及侵袭实验
    1.8 Western blot法检测蛋白表达
    1.9 统计学方法
2 结果
    2.1 LoVo、SW620高表达HNF4A及HT-29、SW480敲降HNF4A的稳定细胞系的构建
    2.2 HNF4A抑制结直肠肿瘤细胞的克隆、增殖能力及降低干细胞标志物的表达
    2.3 敲降HNF4A促进结直肠肿瘤细胞的克隆、增殖及增强干细胞标志物的表达
    2.4 高表达HNF4A抑制结直肠癌细胞的迁移侵袭
    2.5 敲降HNF4A增强结直肠癌细胞的迁移侵袭
    2.6 HNF4A调节MMP2和MMP9的表达
3 讨论
作者贡献:



本文编号：3801233