武昌罗索线虫营养决定性别分化关键期及相关基因的功能分析

发布时间：2023-04-26 22:57

　　武昌罗索线虫(Romanomermis wuchangensis)是一种昆虫病原索科线虫,可主动侵染多种库蚊和伊蚊的幼虫(孑孓),寄生率即等于害虫的死亡率,生物防治潜力极大。在武昌罗索线虫整个生活史中,营养均来源于其寄生期吸取宿主血淋巴微环境中的营养物质,它的另一个特点是性别分化为营养决定型,即每一宿主体内寄生的线虫越少,每条线虫在宿主体内血淋巴中吸取的营养越多,越有可能发育为雌虫,反之则为雄虫。为探究昆虫病原索科线虫营养决定性别分化的分子机理,本课题组前期通过转录组测序并以秀丽线虫(Caenorhabtditis elegans)为背景筛选出fox-1、tra-2、laf1、fem-1、tra-1、mab-3、mab-7、mab-5、gld-1、egl-4 等10个与性别分化和性腺发育相关的基因,并对其中的fox-1、tra-2、laf1、fem-1、tra-1、mab-3、mab-7等基因的功能进行了初步研究,但对mab-5、gld-1、egl-4基因在武昌罗索线虫性别分化过程中的作用仍认识不足。本文通过观察武昌罗索线虫寄生期的生长状况及停止喂食孑孓以探讨其营养决定性别分化的关键期...

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
1 前言
    1.1 武昌罗索线虫及其宿主
        1.1.1 武昌罗索线虫的生物学特性
        1.1.2 昆虫病原索科线虫研究进展
        1.1.3 蚊子及其危害
    1.2 性别决定与性别分化
        1.2.1 基因决定型
        1.2.2 环境决定型
    1.3 研究的目的和意义
2 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 武昌罗索线虫及其宿主
        2.1.2 实验试剂
        2.1.3 实验仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 比较库蚊和伊蚊对线虫雌雄性比的影响
        2.2.2 寄生1-7天雌雄线虫的体长、体宽
        2.2.3 禁止喂食孑孓对武昌罗索线虫性比的影响
        2.2.4 雌雄线虫不同发育期样本的收集
        2.2.5 RNA的提取和cDNA的合成
        2.2.6 qRT-PCR实验
        2.2.7 dsRNA的合成
        2.2.8 RNAi干扰实验
3 结果与分析
    3.1 武昌罗索线虫性别分化关键期的研究
        3.1.1 比较伊蚊和库蚊对武昌罗索线虫性比的影响
        3.1.2 感染强度对武昌罗索线虫体长的影响
        3.1.3 武昌罗索线虫寄生期1-7天雌雄虫生长状况
        3.1.4 寄生第3-5天禁止喂食孑孓对线虫性比的影响
        3.1.5 禁止喂食孑孓对线虫生长状况的影响
    3.2 Rwugld-1、Rwumab-5、Rwuegl-4基因的表达及功能分析
        3.2.1 gld-1、mab-5、egl-4基因在线虫不同发育期的表达模式
        3.2.2 敲降gld-1、mab-5、egl-4基因后对线虫性比的影响
        3.2.3 干扰gld-1基因后对线虫性别决定基因的影响
        3.2.4 干扰mab-5基因后对线虫性别决定基因的影响
        3.2.5 干扰egl-4基因后对线虫性别决定基因的影响
        3.2.6 干扰fox-1基因后对线虫性别决定基因的影响
4 讨论
    4.1 武昌罗索线营养决定性别分化关键期的初步探索
    4.2 gld-1、mab-5、egl-4在雌雄线虫不同发育期的表达情况及功能分析
    4.3 干扰基因gld-1、mab-5、egl-4、fox-1后对性别决定基因的影响
    4.4 小结与展望
参考文献
致谢



本文编号：3802353