蒺藜苜蓿TCTP基因的表达特征分析及其互作蛋白筛选

发布时间：2023-04-28 04:07

　　豆科植物与根瘤菌的互利共生关系对农业发展和生态保护都十分有利,研究豆科植物共生相关基因的功能能够更好地利用这种互利互惠关系,促进健康生态农业的发展。本实验对蒺藜苜蓿中TCTP基因进行了功能研究,进一步揭示了该基因在共生结瘤中的分子机制。翻译控制肿瘤蛋白(Translationally controlled tumor protein,TCTP)是一类在真核生物体内广泛存在且高度保守的蛋白,在植物生长发育各个阶段都发挥着重要作用。实验室前期对模式豆科植物蒺藜苜蓿中的TCTP同源基因MTR₁g083380进行了亚细胞定位、RNAi和基因过量表达等研究,证实其在蒺藜苜蓿与根瘤菌共生互作中发挥作用。为进一步了解TCTP基因在豆科植物共生结瘤中的具体功能,本研究进一步对该基因进行了时空表达及启动子组织定位分析,同时通过酵母双杂交实验、双分子荧光互补实验研究其可能的互作蛋白。结果表明,MTR₁g083380基因在蒺藜苜蓿根部不同时期均有表达,其中接种根瘤菌后第18 d表达量最高,而不接种根瘤菌的情况下第28d的表达量达到最高;在接种根瘤菌后不同组织中的表...

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【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
    1.1 豆科植物与共生固氮
        1.1.1 豆科植物与根瘤菌共生体系
        1.1.2 根瘤的形成和类型
        1.1.3 根瘤形成过程及其分子机制
        1.1.4 植物激素在根瘤形成中的作用
    1.2 翻译控制肿瘤蛋白TCTP的研究现状
        1.2.1 TCTP基因的结构特征
        1.2.2 翻译控制肿瘤蛋白在植物中的研究现状
    1.3 研究目的及意义
    1.4 技术路线
第二章 蒺藜苜蓿TCTP基因的表达特征分析
    2.1 前言
    2.2 试验材料和方法
        2.2.1 试验材料和试剂
        2.2.2 系统发育分析
        2.2.3 植物种植和取样
        2.2.4 基因的定量分析
        2.2.5 启动子融合表达载体的构建
        2.2.6 GUS染色与观察
    2.3 结果与分析
        2.3.1 系统发育分析
        2.3.2 Mt TCTP时空表达分析
        2.3.3 Mt TCTP启动子的组织化学定位
    2.4 小结与讨论
第三章 蒺藜苜蓿TCTP互作蛋白的筛选
    3.1 前言
    3.2 实验材料和方法
        3.2.1 实验材料
        3.2.2 试剂与配方、仪器
        3.2.3 酵母双杂交载体构建及互作实验
        3.2.4 双分子荧光互补载体构建及实验
        3.2.5 双分子荧光互补实验
    3.3 结果与分析
        3.3.1 假定互作蛋白的筛选
        3.3.2 酵母双杂交实验
        3.3.3 双分子荧光互补实验
        3.3.4 MTR₁g079790 基因的时空表达分析
    3.4 小结
    3.5 讨论
第四章 结论
参考文献
附录
致谢
个人简历



本文编号：3803709