铁皮石斛DoLIS基因克隆与茉莉酸甲酯诱导表达分析

发布时间：2023-05-03 19:27

　　【目的】克隆铁皮石斛(Dendrobium officinale)芳樟醇合酶(linalool synthase, LIS)基因,分析该基因在铁皮石斛开花期花、叶、茎和根中的表达及茉莉酸甲酯(Methyl Jasmonate, MeJA)诱导表达模式,以期为进一步鉴定其功能及分析铁皮石斛单萜类代谢机制奠定基础。【方法】利用RACE-PCR和RT-PCR技术克隆DoLIS基因全长cDNA序列和开放阅读框(open reading frame, ORF),利用ProtParam和BLAST P在线软件进行理化性质分析和氨基酸同源性比对,采用MEGA 6.0构建系统进化树。利用qPCR方法分析DoLIS基因在开花期铁皮石斛花、叶、茎和根中的表达及MeJA处理后叶片中的表达模式。【结果】DoLIS基因cDNA序列全长2 844 bp,含有1个2 538 bp的ORF,编码845个氨基酸。分子量为98.298 kD,理论等电点为7.04,不稳定系数是46.29,属不稳定蛋白。DoLIS蛋白具有Terpene_cyclase_plant_C

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【文章目录】：
0 引言
1 材料与方法
    1.1 试验材料和试剂
    1.2 试验方法
        1.2.1 总RNA提取和c DNA第1链合成
        1.2.2 Do LIS基因全长c DNA克隆
        1.2.3 Do LIS基因ORF克隆
        1.2.4 Do LIS基因生物信息学分析
        1.2.5 Do LIS基因表达分析
2 结果与分析
    2.1 Do LIS基因全长c DNA克隆
    2.2 Do LIS基因ORF的克隆
    2.3 DoLIS的生物信息学分析
    2.4 Do LIS基因在不同器官的表达
    2.5 茉莉酸甲酯对Do LIS基因表达的影响
3 讨论与结论



本文编号：3807141