斑马鱼tecrb基因的功能研究

发布时间：2023-05-07 22:45

　　神经发育迟滞有两种类型,一种是特异性神经发育迟滞,患者智力发育障碍,不能适应社会,而且伴有明显的身体畸形或其他疾病;另一种为非特异性神经发育迟滞,患者除智力发育障碍之外没有明显的外在表型特征。根据已有文献可知,反式烯脂酰辅酶A还原酶(trans-2,3-enoyl-CoAreductase,TECR)与人类的非特异性神经发育迟滞有关。神经发育迟滞是儿童生长发育过程中最常见的疾病之一,随着科学的不断发展进步,人们迫切希望能了解导致遗传性神经发育迟滞的病理原因及其发病机制,以便早日攻克这种疾病,使更多的病患得到有效的治疗。斑马鱼是发育生物学的重要模式生物,以斑马鱼为模式动物,构建疾病模型成为研究相关疾病的重要方法。TECR基因在斑马鱼中的同源基因为trans-2,3-enoyl-CoA reductase b(tecrb)。我们敲除了斑马鱼的 tecrb 基因,得到+14、-5bp的两种杂合突变体。我们发现杂合体互交后代成鱼中没有纯合突变体,因此我们推测tecrb突变导致纯合突变体死亡。经过研究发现,纯合突变体在孵化后15d内死亡。原位杂交显示tecrb是母源表达基因,在斑马鱼早期胚胎发育...

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
符号说明
一 综述
    1 神经发育迟滞疾病概述
    2 tecrb基因研究进展
二 tecrb基因在斑马鱼生长发育中的作用
    1 实验动物及饲养条件
    2 常用试剂及仪器
        2.1 常用工具酶、试剂盒和常用试剂
        2.2 常用试剂的配制
        2.3 常用实验仪器
    3 实验方法
        3.1 斑马鱼tecrb突变体的鉴定
        3.2 原位杂交分析tecrb在早期胚胎的表达
        3.3 qPCR分析tecrb在幼鱼及成鱼中的表达模式
        3.4 研究tecrb突变体的死亡时间
        3.5 研究斑马鱼tecrb突变体生长发育情况
        3.6 研究斑马鱼tecrb突变体的HACD和KAR表达情况
        3.7 研究斑马鱼tecrb突变体的脑部发育情况
        3.8 研究斑马鱼tecrb突变体的5HT1A的表达情况
        3.9 tecrb基因突变对斑马鱼学习和记忆能力的影响
    4 结果与讨论
        4.1 斑马鱼tecrb突变体分析
        4.2 tecrb在斑马鱼早期胚胎的表达
        4.3 tecrb在幼鱼和成鱼中表达量变化有差异
        4.4 斑马鱼tecrb突变体在孵化后15d内死亡
        4.5 斑马鱼tecrb突变体生长发育无显著影响
        4.6 斑马鱼tecrb突变体的HACD和KAR表达量显著升高
        4.7 斑马鱼tecrb突变体脑部萎缩且神经发育不良
        4.8 斑马鱼tecrb突变体的5HT1A基因的表达量升高
        4.9 tecrb突变杂合体和野生型在学习和记忆能力有差异趋势
        4.10 讨论
参考文献
致谢
学位论文评阅及答辩情况表



本文编号：3811474