胰岛素基因突变对胰岛素原折叠、分泌的影响

发布时间：2023-06-02 04:55

　　目的:单基因糖尿病是单一基因突变引起的一种特殊类型的糖尿病。以胰岛素的基因突变为例,目前为止,人们已发现了超过50种胰岛素的基因突变可导致早发型的糖尿病。天津医科大学总医院的内分泌代谢科为深入了解单基因糖尿病,开展了一项有关单基因糖尿病的筛查工作。为探究不同的胰岛素基因(INS gene)突变的致病机制,本实验研究了其折叠、分泌功能。其次,既往的研究表明,突变所导致的错误折叠的胰岛素原可能通过与其共存的野生型胰岛素原而产生异常作用,这会影响其折叠、加工和分泌,从而进一步加剧了胰岛素的缺乏,这一现象即为错误折叠的胰岛素原对野生型胰岛素原的显性负效应。因此本研究根据以上推测,设计实验方案。方法:首先,制备带有Myc标签的野生型胰岛素原/突变胰岛素原的过表达质粒,然后将其分别转染到293T细胞中,转染48小时后收取细胞及培养基中的蛋白,统计胰岛素原含量并计算其分泌率,同时将细胞中的蛋白两等分,一半不加特殊处理,另一半加还原试剂以打开二硫键,比较不同胰岛素原存在的错误折叠情况。其次,将Myc标记的的胰岛素原与未标记的野生型胰岛素原共同转染入293T细胞中,转染48小时后,用裂解效果温和型的细胞...

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
缩略语/符号说明
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
1.对象和方法
    1.1 单基因糖尿病筛查标准
    1.2 材料和仪器
    1.3 研究方法
2.结果
    2.1 不同的胰岛素基因突变所致的临床表现严重程度不同
    2.2 胰岛素基因突变可导致突变胰岛素原的错误折叠增多及分泌能力下降
    2.3 突变胰岛素原能与野生型胰岛素原形成分子间作用
    2.4 突变胰岛素原可影响野生型胰岛素原的折叠和分泌
    2.5 突变胰岛素原主要定位在内质网且可以影响Ins1细胞中胰岛素的合成
3.讨论
结论
参考文献
综述 胰岛素基因及其突变与单基因糖尿病的关系
    综述参考文献
致谢
个人简历



本文编号：3827708