菰黑粉菌UePkaC基因的克隆及功能研究

发布时间：2023-06-16 19:12

　　菰黑粉菌(Ustilago esculenta)是一种二态性真菌,具有侵染菰(Zizania latifolia)植株的能力,并可使植株茎部膨大形成茭白。二型态转换对菰黑粉菌的侵染能力及致病性至关重要。促丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)信号级联途径和环化腺苷酸介导的蛋白激酶A (cyclic adenosine monophosphate-protein kinase A, cAMP-PKA)信号转导途径是真菌二型态转换的核心。本研究发现,外源添加cAMP后单倍体出现多位点芽殖现象,且融合菌丝生长受到影响。进一步克隆得到了编码菰黑粉菌PKA催化亚基的基因UePkaC (PkaC like protein in Ustilago esculenta)基因(GenBank No.KR870334.1)。序列分析结果显示,该基因全长1 346 bp,有1个内含子,两个外显子构成大小为1 233 bp的开放阅读框,编码410个氨基酸。该氨基酸序列与其他物种中PKA催化亚基的氨基酸序列同源,如大麦坚黑粉菌(U. hordei)、玉...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验材料
    1.2 培养基与试剂
    1.3 菰黑粉菌Ue Pka C基因的克隆与生物信息学分析
    1.4 菰黑粉菌生长速率的测定
    1.5 体外融合实验
    1.6 荧光定量PCR
    1.7 Ue Pka C基因敲除菌株的构建
    1.8 菰植株的侵染
    1.9 共聚焦显微观察
2 结果与分析
    2.1 外源添加c AMP对菰黑粉菌单倍体生长与融合的影响
    2.2 Ue Pka C基因的克隆与鉴定
    2.3 Ue Pka C基因的表达模式分析
    2.4 Ue Pka C基因的缺失对单倍体生长形态及其生长速率的影响
    2.5 Ue Pka C基因缺失对菰黑粉菌融合的影响
    2.6 Ue Pka C基因缺失对a基因表达的影响
    2.7 Ue Pka C基因的缺失对菌株致病力的影响
3 讨论
4 结论



本文编号：3833816