牙龈卟啉单胞菌唾液酸酶基因缺失对巨噬细胞极化及吞噬能力的影响

发布时间：2023-06-18 03:50

　　目的:牙周炎是牙菌斑中的微生物所引起的牙周支持组织的慢性感染性疾病,可导致牙周支持组织的破坏。牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)是牙周炎的主要致病菌,可以通过多种途径逃避宿主天然免疫系统的防御。巨噬细胞是机体内重要的效应细胞,其可以活化为不同的表型如经典活化巨噬细胞(M1型)和选择性活化巨噬细胞(M2型)。PG0352是P.gingivalis W83中唯一编码唾液酸酶的基因。我们构建了P.gingivalis W83唾液酸酶基因突变株(ΔPG0352)。研究发现该突变株更易于被巨噬细胞所清除,并且这种作用可能与ΔPG0352促进巨噬细胞的M1极化有关。因此,我们推测ΔPG0352可能是通过促进巨噬细胞的M1极化,进而增强巨噬细胞的免疫清除能力。本研究目的是利用P.gingivalis W83、ΔPG0352、回复株comΔPG0352和E.coli分别感染巨噬细胞,检测它们对巨噬细胞极化、抗原提呈能力和吞噬能力的影响,并建立大鼠牙周炎模型验证体外实验的结果。旨在探索唾液酸酶基因缺失对巨噬细胞极化及吞噬能力的影响,为慢性牙周炎的...

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
英文缩略语
1 前言
2 材料方法
    2.1 主要试剂和仪器
        2.1.1 主要设备
        2.1.2 主要试剂
        2.1.3 实验菌株及细胞
    2.2 实验方法
        2.2.1 菌株和生长条件
        2.2.2 细胞的培养和巨噬细胞的准备
        2.2.3 透射电镜观察
        2.2.4 ELISA检测IL-12、iNOS、IL-10和Arg-1 的水平
        2.2.5 免疫荧光检测不同菌株感染巨噬细胞后MHC-II的表达
        2.2.6 流式细胞术检测巨噬细胞表面CD68、CD80和CD206 的表达
        2.2.7 流式细胞术检测巨噬细胞吞噬活性
        2.2.8 大鼠牙周炎模型的构建
        2.2.9 免疫组化染色分析大鼠牙龈组织CD163和i NOS的表达
        2.2.10 体视显微镜观察大鼠牙槽骨吸收情况
    2.3 统计分析
3 结果
    3.1 PMA诱导U937细胞向M0型巨噬细胞分化
    3.2 细菌感染巨噬细胞后巨噬细胞形态的改变
    3.3 ΔPG0352对巨噬细胞M1和M2极化因子的影响
    3.4 ΔPG0352增强了巨噬细胞M1极化表面标志物的表达
    3.5 巨噬细胞对ΔPG0352的吞噬能力增强
    3.6 牙龈组织中 iNOS 和CD163表达水平
    3.7 牙槽骨吸收情况
4 讨论
5 结论
本研究创新性的自我评价
参考文献
综述
    参考文献
病例报告
    参考文献
攻读学位期间取得的科研成果
致谢
个人简历



本文编号：3834722