拟南芥SDR6基因的抗病机制分析
发布时间:2023-07-25 04:40
灰葡萄孢(Botrytis cinerea)是引起植物灰霉病的一种重要的植物病原真菌,其寄主范围广泛,常给农业生产造成严重的经济损失。挖掘植物抗灰葡萄孢的相关基因,探究其抗病的分子机制,为阐明植物与灰葡萄孢互作的分子机理及灰霉病的防治奠定基础。实验室前期研究获得了拟南芥抗灰葡萄孢相关基因SDR6,明确了SDR6基因参与拟南芥对灰葡萄孢和Pst DC3000(Pseudomonas syringae pv.tomato DC3000)的抗性。本研究对SDR6基因与SA、JA信号途径的关系进行分析;检测SDR6基因调控拟南芥抗灰葡萄孢和Pst DC3000的机制;通过酵母双杂交技术、双分子荧光互补技术,鉴定SDR6的候选互作蛋白。研究结果为进一步阐明拟南芥SDR6基因调控拟南芥抗病的分子机制奠定基础。1.利用RT-qPCR技术,检测SA、BTH、ACC、MeJA处理拟南芥野生型Col-0和SA、JA/ET信号途径突变体中SDR6基因的表达情况,分析SDR6基因与SA、JA/ET信号途径的关系。结果发现,野生型中,SA、BTH和MeJA处理对SDR6基因的表达均有诱导作用;SA信号途径突变体...
【文章页数】:56 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
abstract
英文缩写表
1 引言
1.1 拟南芥抗病相关基因的研究现状
1.2 SDR家族研究现状
1.3 本研究的目的和意义
2 材料和方法
2.1 供试材料
2.1.1 供试拟南芥、菌株
2.1.2 供试试剂
2.1.3 供试仪器设备
2.1.4 供试培养基、缓冲溶液
2.2 拟南芥的种植
2.3 拟南芥总RNA的提取及cDNA合成
2.3.1 拟南芥总RNA的提取
2.3.2 cDNA的合成
2.4 SDR6基因与SA、JA/ET信号途径的关系分析
2.4.1 拟南芥野生型中SDR6基因的表达分析
2.4.2 SA、JA/ET信号途径突变体中SDR6基因的表达分析
2.5 SDR6基因调控拟南芥抗灰葡萄孢的机制分析
2.5.1 SDR6基因突变体对灰葡萄孢抗病性的测定
2.5.2 灰葡萄孢对抗病相关基因表达的影响
2.6 SDR6基因调控拟南芥抗PstDC3000的机制分析
2.6.1 SDR6基因突变体对PstDC3000的抗病性测定
2.6.2 PstDC3000对抗病相关基因表达的影响
2.7 SDR6基因候选互作蛋白的鉴定
2.7.1 SDR6基因候选互作蛋白的酵母双杂交鉴定
2.7.2 SDR6候选互作蛋白的亚细胞定位分析
2.7.3 SDR6基因候选互作蛋白的双分子荧光互补鉴定
3 结果与分析
3.1 SDR6基因与SA、JA/ET信号途径的关系分析
3.1.1 拟南芥野生型中SDR6基因的表达分析
3.1.2 SA、JA/ET信号途径突变体中SDR6基因的表达分析
3.2 SDR6基因调控拟南芥抗灰葡萄孢的机制分析
3.2.1 SDR6基因突变体对灰葡萄孢抗病性的测定
3.2.2 灰葡萄孢对抗病相关基因表达的影响
3.3 SDR6基因调控拟南芥抗PstDC3000的机制分析
3.3.1 SDR6基因突变体对PstDC3000的抗病性测定
3.3.2 PstDC3000对抗病相关基因表达的影响
3.4 SDR6基因候选互作蛋白的鉴定
3.4.1 SDR6基因候选互作蛋白的酵母双杂交鉴定
3.4.2 SDR6候选互作蛋白的亚细胞定位分析
3.4.3 SDR6基因候选互作蛋白的双分子荧光互补鉴定
4 讨论
4.1 SDR6基因与SA、JA/ET信号途径的关系
4.2 SDR6及其候选互作蛋白的验证
5 结论
参考文献
作者简历
致谢
详细摘要
本文编号:3837177
【文章页数】:56 页
【学位级别】:硕士
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摘要
abstract
英文缩写表
1 引言
1.1 拟南芥抗病相关基因的研究现状
1.2 SDR家族研究现状
1.3 本研究的目的和意义
2 材料和方法
2.1 供试材料
2.1.1 供试拟南芥、菌株
2.1.2 供试试剂
2.1.3 供试仪器设备
2.1.4 供试培养基、缓冲溶液
2.2 拟南芥的种植
2.3 拟南芥总RNA的提取及cDNA合成
2.3.1 拟南芥总RNA的提取
2.3.2 cDNA的合成
2.4 SDR6基因与SA、JA/ET信号途径的关系分析
2.4.1 拟南芥野生型中SDR6基因的表达分析
2.4.2 SA、JA/ET信号途径突变体中SDR6基因的表达分析
2.5 SDR6基因调控拟南芥抗灰葡萄孢的机制分析
2.5.1 SDR6基因突变体对灰葡萄孢抗病性的测定
2.5.2 灰葡萄孢对抗病相关基因表达的影响
2.6 SDR6基因调控拟南芥抗PstDC3000的机制分析
2.6.1 SDR6基因突变体对PstDC3000的抗病性测定
2.6.2 PstDC3000对抗病相关基因表达的影响
2.7 SDR6基因候选互作蛋白的鉴定
2.7.1 SDR6基因候选互作蛋白的酵母双杂交鉴定
2.7.2 SDR6候选互作蛋白的亚细胞定位分析
2.7.3 SDR6基因候选互作蛋白的双分子荧光互补鉴定
3 结果与分析
3.1 SDR6基因与SA、JA/ET信号途径的关系分析
3.1.1 拟南芥野生型中SDR6基因的表达分析
3.1.2 SA、JA/ET信号途径突变体中SDR6基因的表达分析
3.2 SDR6基因调控拟南芥抗灰葡萄孢的机制分析
3.2.1 SDR6基因突变体对灰葡萄孢抗病性的测定
3.2.2 灰葡萄孢对抗病相关基因表达的影响
3.3 SDR6基因调控拟南芥抗PstDC3000的机制分析
3.3.1 SDR6基因突变体对PstDC3000的抗病性测定
3.3.2 PstDC3000对抗病相关基因表达的影响
3.4 SDR6基因候选互作蛋白的鉴定
3.4.1 SDR6基因候选互作蛋白的酵母双杂交鉴定
3.4.2 SDR6候选互作蛋白的亚细胞定位分析
3.4.3 SDR6基因候选互作蛋白的双分子荧光互补鉴定
4 讨论
4.1 SDR6基因与SA、JA/ET信号途径的关系
4.2 SDR6及其候选互作蛋白的验证
5 结论
参考文献
作者简历
致谢
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本文编号:3837177
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