小鼠Ogg1基因pET28a-mOgg1原核表达系统建立及其生物信息学探讨

发布时间：2023-08-20 09:21

　　将小鼠Ogg1(mOgg1)基因克隆至pET-28a(+)原核表达载体上,分析其相关的生物信息学特性.运用分子克隆的方法,获得重组质粒pET28a-mOgg1;经同源性分析证实与NCBI基因库中mOgg1基因相似度为100%;mOgg1基因可翻译成345个氨基酸序列,翻译后的蛋白不存在N-糖基化位点、跨膜螺旋区域,不含信号肽且无信号肽剪切位点,但含有31个磷酸化位点;运用在线软件对mOgg1蛋白进行结构分析并建立蛋白的3D结构,发现在该蛋白链上含有48%α螺旋、10%β折叠.成功获得了pET28a-mOgg1重组质粒,并对重组蛋白进行Western-blot鉴定,从基因及氨基酸组成上分析该蛋白的特性,由此探讨mOgg1基因及蛋白表达相关的生物信息学特性.

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 实验动物
        1.1.2 仪器与试剂
    1.2 方法
        1.2.1 小鼠肝组织RNA提取以及cDNA获取
        1.2.2 mOgg1基因的克隆及测序分析
        1.2.3 mOgg1蛋白序列分析及蛋白的结构预测与功能分析
        1.2.4 pET28a-mOgg1表达蛋白的Western-blot鉴定
2 结果
    2.1 mOgg1基因PCR扩增产物
    2.2 重组质粒pET28a-mOgg1 PCR鉴定结果
    2.3 mOgg1基因测序结果及其不同物种同源性分析
    2.4 mOgg1基因氨基酸序列分析
    2.5 抗原肽分析
    2.6 mOgg1蛋白结构预测
    2.7 重组质粒pET28a-mOgg1表达蛋白的Western-blot鉴定
3 讨论



本文编号：3842944