利用CRISPR/Cas9基因编辑系统构建TP53基因敲除HeLa细胞系（英文）

发布时间：2023-08-20 10:38

　　该研究利用CRISPR/Cas9(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR associated protein 9)基因编辑系统构建了TP53(tumor antigen p53)基因敲除He La细胞系。CRISPR/Cas9系统能够精确地切开TP53基因并在双链断裂处插入选择标记(通过与供体质粒进行同源重组获得)。进一步的功能试验表明,TP53基因敲除的He La细胞拥有更强的细胞增殖能力、化疗耐药性以及氧化应激能力,提示He La(TP53–/–)恶性程度增强。所有的数据旨在描述一个简单和有效的方法,即通过CRISPR/Cas9系统来构建基因缺失细胞系,期望在较大程度上帮助研究和阐明基因功能以及细胞机制。

【文章页数】：9 页

【文章目录】：
1 Materials and methods
    1.1 Cell culture and plasmids construction
    1.2 Transfection and selection
    1.3 T7EI assay
    1.4 PCR genotyping of single clones
    1.5 Western blot assay
    1.6 MTT assay
    1.7 Statistical analysis
2 Results
    2.1 Generation of TP53 knockout in He La cells
    2.2 Phenotypic characterization of He La(TP53–/–)cells obtained after CRISPR treatment
3 Discussion



本文编号：3843054