利用基因敲除小鼠对CIB1、CIB2在听觉系统中功能的初步探讨

发布时间：2023-10-02 03:39

　　耳聋基因编码蛋白CBB2隶属于钙整合素结合蛋白家族。此蛋白家族包括CIB1至CIB4四个蛋白,它们均包含多个钙离子结合结构域(EF-hand)。目前对于CIB蛋白家族的研究主要集中于CIB1在细胞增殖和凋亡、血管再生以及细胞骨架形成等过程中的作用。有研究表明CIB2的突变是导致人类非综合征型耳聋DFNB48和综合征型耳聋USHIJ的原因,但CIB2在听觉中的功能及突变致聋机制日前还不清楚。我们首先在mRNA水平检测了小鼠内耳中Cib1至Cib4的表达情况,结果显示Cib1和Cib2在耳蜗中有较高水平的表达。因此我们利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建了Cib1和Cib2敲除小鼠。Cib1的敲除并没有影响小鼠的听觉功能,而敲除了Cib2之后小鼠的听力受到了严重的损伤。在进一步的研究中,我们发现Cib2敲除之后小鼠的听纤毛发育出现了明显的异常。在Cib2敲除小鼠中有相当数量外毛细胞的静纤毛束不能呈现正常的“V”字型,并且第二排静纤毛发生了异常延长的现象。同时我们观测到在Cib2敲除小鼠的部分内毛细胞中动纤毛未能正常退化,静纤毛发生了一定程度的融合。我们还检测到Cib2敲除小鼠毛细胞机...

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【学位级别】：硕士

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中文摘要
ABSTRACT
缩略词表
前言
第一部分 Cib2及其家族基因在小鼠各组织中的表达
    1.1 材料试剂与主要仪器设备
    1.2 实验方法
    1.3 实验结果
第二部分 Cib1以及Cib2敲除小鼠的构建及鉴定
    2.1 材料试剂与主要仪器设备
    2.2 实验方法
    2.3 实验结果
第三部分 Cib1敲除对小鼠听力没有影响
    3.1 材料试剂与主要仪器设备
    3.2 实验方法
    3.3 实验结果
第四部分 Cib2敲除导致严重耳聋
    4.1 材料试剂与主要仪器设备
    4.2 实验方法
    4.3 实验结果
第五部分 Cib2敲除影响小鼠听纤毛发育
    5.1 材料试剂与主要仪器设备
    5.2 实验方法
    5.3 实验结果
第六部分 Cib2敲除严重影响小鼠毛细胞MET通道功能
    6.1 材料试剂与主要仪器设备
    6.2 实验方法
    6.3 实验结果
第七部分 讨论
参考文献
致谢
硕士期间发表的论文
学位论文评阅及答辩情况表



本文编号：3850022