慢病毒介导TFF3基因转染A549细胞对NF-κB表达的影响

发布时间：2023-10-06 19:07

　　目的探讨核因子(NF)-κB在慢病毒转染过表达及沉默三叶因子(TFF)3基因的人非小细胞肺癌A549细胞中的表达意义。方法慢病毒包装TFF3基因全长片断及TFF3短发卡RNA质粒,病毒液转染A549细胞,获得稳定过表达及沉默TFF3表达的A549细胞株,实时荧光定量PCR(qPCR)和Western印迹法检测TFF3、NF-κB、B细胞淋巴瘤基因(Bcl)-2、细胞周期蛋白(Cyclin)D1基因及蛋白的表达水平。结果过表达TFF3的A549细胞(TFF3)中TFF3基因较对照组增高(655±135)倍,蛋白水平较Vec组显著增高;沉默TFF3基因的A549细胞(shTFF3)沉默TFF3效率约为75%,蛋白水平也较shCK组明显降低(均P<0.01)。TFF3组NF-κB、Bcl-2、CyclinD1 mRNA及蛋白表达水平明显高于Vec组(P<0.05),shTFF3组NF-κB、Bcl-2、CyclinD1 mRNA及蛋白水平较shCK组明显降低(P<0.01)。结论 TFF3的表达与NF-κB密切相关,过表达TFF3能够激活NF-κB,促进CyclinD1和抗...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 细胞培养
    1.3 慢病毒包装TFF3增强和沉默质粒
    1.4 实时荧光定量PCR法检测目的基因的表达水平
    1.5 Western印迹蛋白检测
    1.6 统计学处理
2 结 果
    2.1 慢病毒转染后稳转株建立
    2.2 NF-κB mRNA、Bcl-2 mRNA、CyclinD1 mRNA相对表达量变化
    2.3 NF-κB、Bcl-2、CyclinD1蛋白在过表达及沉默TFF3基因的A549细胞中的表达变化
3 讨 论



本文编号：3852295