桂花RAP2-12基因的克隆与表达模式分析

发布时间：2023-11-20 17:47

　　该研究以桂花‘日香桂’花瓣为材料,采用RT-PCR方法克隆桂花OfRAP2-12基因,并进行生物信息学分析,比较该基因在桂花花香较淡品种‘日香桂’和花香较浓品种‘波叶金桂’不同组织、不同花发育时期和日周期的表达丰度,鉴定其编码蛋白的亚细胞定位,进一步分析基因表达与花香物质含量的相关性,以探究其与花香物质的关系,为桂花花香物质合成的分子机制研究奠定基础。结果显示:(1)成功克隆获得桂花OfRAP2-12基因,所得目的片段长度为1 367 bp,包含一个长度966 bp的ORF,编码321个氨基酸。(2)基因序列和系统发育分析表明,OfRAP2-12编码蛋白包含核心真双子叶植物ERF-B2亚家族RAP2-12保守结构域,其与木犀科物种RAP2-12聚为一支,具有种系特异性。(3)在线预测结果显示,OfRAP2-12蛋白定位在细胞核中,且主要分布在质膜(69%)和内质网膜(64%);构建35S∷OfRAP2-12-GFP融合蛋白表达载体,通过农杆菌介导法侵染到本氏烟草的叶片下表皮2 d后,激光共聚焦显微镜观察发现,在细胞核和细胞质膜上都能明显观测到35S∷OfRAP2-12-GFP融合蛋白的...

【文章页数】：10 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 植物材料
    1.2 方 法
        1.2.1 桂花OfRAP2-12基因的CDS克隆
        1.2.2 桂花OfRAP2-12基因序列分析和表达分析
        1.2.3 桂花OfRAP2-12基因编码蛋白的亚细胞定位试验
        1.2.4 桂花OfRAP2-12基因表达与花香物质释放规律的相关性分析
2 结果与分析
    2.1 桂花OfRAP2-12基因的CDS克隆及其编码蛋白分析
    2.2 桂花OfRAP2-12氨基酸序列比对及系统发育树分析
    2.3 桂花OfRAP2-12基因的表达模式分析
    2.4 桂花OfRAP2-12蛋白的亚细胞定位
    2.5 桂花OfRAP2-12基因表达与花香物质释放规律的相关性分析
3 讨 论



本文编号：3865534