microRNA-338通过靶向EphA2基因及调节Wnt/β-catenin信号通路抑制胃癌发展的机制研究

发布时间：2023-11-20 18:02

　　研究背景:胃癌(gastric cancer)是世界范围内第四大最常见的癌症,具有发病率高、死亡率高及预后不良等特点。尽管近几十年来死亡率稳步下降,胃癌仍然是最致命的肿瘤之一,尤其是晚期胃癌患者存在远距离转移和复发,其五年生存率只有30%左右。大约三分之二的患者在诊断时有转移性病灶,高达一半的患者在治疗性手术后复发,这些患者的平均生存时间只有6-9个月。这主要是由于以下几个原因造成的:早期诊断的诊断策略有限;组织学指标对预后的价值较弱;晚期疾病的手术或细胞毒性治疗效果有限;缺乏用于靶向治疗的分子标记。因此,有必要对胃癌进展的分子机制进行深入研究,来发现有效的治疗策略和新的药物靶点。microRNAs(miRs)是一类长度大约为21-23个核苷酸的内源性RNA。目前为止人们发现它在多种生物学过程中发挥重要作用,例如细胞增殖、分化和癌变。已有大量证据表明,microRNA在多种癌症组织中的表达失调,可以作为不同类型癌症的潜在生物标志物。特别地,在胃癌患者的肿瘤组织和体液中有几种microRNA异常表达,在临床应用中显示出良好的前景。miR-33 8-3p可以作为一种肿瘤抑制因子抑制肝细胞、...

【文章页数】：82 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
符号说明
第一章 引言
    1.1 microRNA与疾病的关系
    1.2 miR-338与胃癌发生、发展的关系
    1.3 上皮间质转化(EMT)
        1.3.1 Wnt/β-catenin通路在EMT中的作用
        1.3.2 EphA2分子与EMT
    1.4 研究内容与意义
第二章 实验材料及方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 组织样品收集及处理
        2.1.2 细胞系
        2.1.3 实验动物
        2.1.4 引物
        2.1.5 抗体
        2.1.6 质粒
        2.1.7 主要实验试剂
        2.1.8 主要实验仪器
    2.2 常用培养基和试剂的配制
        2.2.1 琼脂糖凝胶电泳溶液配制
        2.2.2 磷酸盐缓冲液PBS配制
        2.2.3 MTT工作液配制
    2.3 实验方法
        2.3.1 RT-PCR表达量检测
        2.3.2 质粒转染
        2.3.3 MTT细胞活力试验
        2.3.4 Annexin V-FITC/PI流式细胞试验
        2.3.5 Western blot蛋白表达检测
        2.3.6 Transwell侵袭实验
        2.3.7 异种移植
        2.3.8 统计学分析
第三章 实验结果
    3.1 miR-338在胃癌组织及细胞中的表达情况
    3.2 miR-338表达在胃癌中的临床意义
    3.3 miR-338抑制胃癌细胞增殖和侵染的能力,并促进细胞凋亡
    3.4 miR-338可以导致EMT相关标记物表达失调和β-Catenin下调
    3.5 miR-338可以下调胃癌细胞EphA2表达并调控Wnt/β-Catenin通路
    3.6 抑制EphA2蛋白表达可以导致EMT相关标记物失调和β-Catenin下调
    3.7 miR-338在动物体内通过EphA2抑制肿瘤生长和Wnt信号通路活性
第四章 实验讨论
附录、附图表
参考文献
综述:MicroRNA用于胃癌临床诊断和治疗的研究现状
    参考文献
致谢
攻读学位期间发表的学术论文目录
学位论文评阅及答辩情况
外文论文
学位论文评阅及答辩情况表



本文编号：3865557