RRS1/Rrs1基因对乳腺癌侵袭转移功能的影响
发布时间:2024-01-24 16:27
研究目的:RRS1(核糖体合成调节蛋白1)是岛津于1999年在酵母中发现的一种新型核糖体合成调节蛋白,它在核糖体生物合成中参与25s rRNA的成熟和60s核糖体大亚基的组装。近几年研究发现RRS1在人类某些肿瘤中过表达,与结直肠癌,肝癌和乳腺癌的增殖有关,但其在乳腺癌转移中的作用仍不清楚。本研究通过体外乳腺癌细胞功能实验和体内小鼠乳腺癌模型探讨人源RRS1/小鼠源Rrs1对乳腺癌转移的影响。研究方法:(1)蛋白免疫印迹法(WB)和实时荧光定量PCR(qPCR)检测RRS1在人乳腺癌MDA-MB-231细胞、小鼠乳腺癌4T1细胞及正常乳腺上皮细胞HMEC中蛋白及mRNA水平的表达量。(2)MDA-MB-231细胞采用慢病毒ShRNA-RRS1转染的方式,敲降RRS1基因的表达量,4T1细胞采用小干扰siRNA-Rrs1转染的方式,敲降Rrs1基因的表达量,并用质粒转染的方式过表达Rrs1。转染结束,使用荧光显微镜观察细胞转染效率,并用qPCR和Western Blotting进一步检测RRS1敲降效率、Rrs1敲降及过表达效率。(3)采用CCK8实验检测MDA-MB-231细胞RRS1...
【文章页数】:50 页
【学位级别】:硕士
本文编号:3884086
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图1(A、B)WB检测RRS1基因在乳腺癌细胞MCF7,BT549,MDA-MB-231,4T1和正常乳腺细胞HMEC中的表达量
图3(A)CCK8实验检测Rrs1基因敲降后,对4T1细胞增殖的抑制作用,Rrs1过表达后,对4T1细胞增殖的促进作用
图4(A)划痕实验检测小鼠乳腺癌4T1细胞与人乳腺癌MDA-MB-231细胞中RRS1/Rrs1基因对细胞迁移的影响,每组n=4,Bar=200μm,**P<0.01
图5(A)全功能微孔板检测仪检测,LUC-4T1细胞化学发光强度是4T1细胞的5倍
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