重叠基因CD3EAP和PPP1R13L共表达模式及其miRNA调控在多环芳烃致肺癌变中的作用与机制

发布时间：2024-01-25 12:55

　　目的:肺癌是最常见的恶性肿瘤之一,世界范围内,肺癌的发病率和死亡率高居肿瘤首位。肺癌进展迅速,病死率高,也是严重危害我国国民身体健康的一个重大公共卫生问题。寻找合理有效的生物标志,做到有效预防、早期诊断及合理治疗对提高患者生存率和生存质量有着重要的意义。人群流行病学及肿瘤病因学研究认为肺癌的发生是环境和遗传因素共同作用的结果。“体细胞突变学说”目前仍然是一种公认的致癌机制学说。环境致癌因子多环芳烃的代表物质B[a]P广泛存在于香烟烟雾、发动机废气、石油等燃烧产生的烟气中,甚至农业土壤中。B[a]P是一种间接致癌物,在进入人体后迅速分布在人体各种组织中在通过细胞色素P450酶代谢成终致癌物BPDE发挥致癌作用。BPDE具有亲核性可以与DNA形成BPDE-DNA加合物,会导致一些重要基因的突变:如癌基因的激活或抑癌基因的失活,成为肿瘤发生发展的起始动力。PPP1R13L是新近发现的一个重要的原癌基因,是高度保守的TP53凋亡刺激蛋白家族的第三个成员,可抑制另外两个成员(ASPP1和ASPP2)发挥抑癌作用,对野生型TP53活性进行特异性负调节并抑制细胞凋亡,促进细胞异常增殖。PPP1R13...

【文章页数】：110 页

【学位级别】：博士

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摘要
Abstract
英文缩略语
第一部分 CD3EAP与PPP1R13L共表达分子模式在多环芳烃致肺癌变中的特征分析
    1 前言
    2 材料与方法
        2.1 主要试剂与仪器
        2.2 实验方法
        2.3 统计方法
    3 结果
        3.1 病例基本信息
        3.2 肺癌与癌旁组织中CD3EAP、PPP1R13L mRNA差异表达
        3.3 CD3EAP和PPP1R13L mRNA表达水平与性别、年龄、吸烟饮酒等特征的分层分析
        3.4 CD3EAP与PPP1R13L mRNA水平的相关性
        3.5 肺癌与癌旁组织中CD3EAP与PPP1R13L蛋白表达
        3.6 肺癌与癌旁组织中CD3EAP与PPP1R13L蛋白表达相关性分析
        3.7 不同代数恶性转化细胞的迁移能力
        3.8 不同代数恶性转化细胞的侵袭能力
        3.9 恶性转化不同代数细胞的恶性增殖能力
        3.10 恶性转化细胞裸鼠皮下致瘤
        3.11 恶性转化过程细胞中CD3EAP与PPP1R13L mRNA水平相关性验证
    4 讨论
第二部分 CD3EAP与PPP1R13L在mRNA和蛋白水平相互作用的分子机制探讨
    5 前言
    6 材料与方法
        6.1 主要试剂与仪器
        6.2 实验方法
    7 结果
        7.1 PPP1R13L和CD3EAP敲低实验
        7.2 PPP1R13L和CD3EAP过表达实验
        7.3 PPP1R13L与CD3EAP蛋白质相互作用
        7.4 CD3EAP和PPP1R13L对RelA蛋白核转位能力的影响
    8 讨论
第三部分 miRNA对重叠基因CD3EAP与PPP1R13L的调控作用分析
    9 前言
    10 材料与方法
        10.1 主要试剂与仪器
        10.2 实验方法
        10.3 统计方法
    11 结果
        11.1 生物信息学预测调控CD3EAP或PPP1R13L的miRNA
        11.2 双荧光素酶报告基因法验证miRNA对靶基因的直接调控作用
        11.3 肺癌与癌旁组织miR-182-5p和miR-125a-3p的表达水平
        11.4 肺癌组织中miR-125a-3p和miR-182-5p表达水平与性别、年龄、吸烟饮酒等特征的关联性分析
        11.5 肺癌和癌旁组织中miRNA和其靶基因PPP1R13L、CD3EAPm RNA表达相关性分析
        11.6 miRNA模拟物转染A549细胞系对靶基因和重叠基因mRNA和蛋白水平的影响
        11.7 miRNA模拟物转染A549细胞系RelA功能的影响
    12 讨论
本研究创新性的自我评价
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历



本文编号：3884859