生物节律钟基因LHY、CCA1调控拟南芥营养生长时相转变的研究

发布时间：2024-02-14 01:41

　　高等植物的生长发育是一个复杂的过程,可划分为营养生长和生殖生长两个阶段,其中营养生长阶段又可分为幼龄期和成熟期,而幼龄期(juvenile stage)到成熟期(adult phase)的转变被称为营养生长时相转变(vegetative phase change,VPC)。VPC是植株生长过程中不可缺少的过程,受基因表达的调控。VPC与叶片形态学、细胞学以及分子层面上的变化有相关联系。其中远轴面表皮毛的出现常常作为VPC出现标志;茎顶端分生组织的凸起程度可作为划分幼龄期到成熟期的分界线;VPC与小分子RNA-miR156与靶基因SPL3表达水平的变化相联系。植物体内存在一个生物钟控制机制,在长期进化过程中,生物钟随环境及昼夜变化的影响,从而完成植物的生长发育进程,调控生物钟的内在循环机制叫做生物节律钟(circadian clock)。尽管生物节律钟的研究比较透彻,但生物节律钟基因对植株VPC的作用还有待深入研究。本研究以拟南芥生物节律钟基因双突变体thycca1以及LHY、CCA1超表达植株为研究对象,分别通过形态学、细胞学和分子层面进行研究并分析生物节律钟基因LHY、CCA1对VP...

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
缩略词
第一章 前言
    1.1 模式植物拟南芥
    1.2 植物的生长发育阶段
    1.3 营养生长时相转变
    1.4 茎顶端分生组织
    1.5 营养生长时相转变分子机制
    1.6 生物节律钟
    1.7 研究目的及意义
第二章 材料与方法
    2.1 实验材料
    2.2 实验方法
        2.2.1 材料培养
        2.2.2 LHY、CCA1基因表达载体的构建
        2.2.3 LHY、CCA1转基因植株的获取
        2.2.4 转基因植株的检测
        2.2.5 拟南芥形态学观察
        2.2.6 制作石蜡切片
        2.2.7 半定量与荧光定量PCR
第三章 结果与分析
    3.1 LHY、CCA1基因的扩增
    3.2 LHY、CCA1重组质粒的提取和双酶切
    3.3 表达载体的连接
    3.4 35S::LHY、35S::CCA1转基因植株筛选
    3.5 35S::LHY、35S::CCA1转基因植株的鉴定
        3.5.1 35S::LHY转基因植株的鉴定
        3.5.2 35S::CCA1转基因植株的鉴定
    3.6 植株形态学观察
        3.6.1 叶形分析及出现远轴面表皮毛的莲座叶
        3.6.2 植株生长速率
        3.6.3 叶片长宽比
        3.6.4 叶基角
    3.7 茎顶端分生组织结构特征
    3.8 miR156及SPL3表达分析
        3.8.1 半定量PCR
        3.8.2 荧光定量PCR
第四章 讨论
    4.1 植株形态学变化与VPC的关系
    4.2 茎顶端分生组织的变化与VPC的关系
    4.3 miR156和SPL3表达情况与VPC的关系
    4.4 生物节律钟基因与VPC的关系
参考文献
致谢
硕士期间发表的论文



本文编号：3897540