抑制JWA基因表达对细胞因子TGF-β1诱导的心肌细胞凋亡的机制研究

发布时间：2024-03-07 17:56

　　目的:研究抑制JWA基因的表达对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的心肌细胞凋亡的影响及作用机制。方法:用TGF-β1转染JWA RNA处理体外培养大鼠心肌H9c2心肌细胞,采用反转录聚合酶链技术(RT-PCR)和Western blot法检测心肌细胞中JWA的表达水平的变化,采用噻唑蓝(MTT)检测心肌细胞增殖情况,流式细胞术检测心肌细胞凋亡情况,对比检测心肌细胞中凋亡相关蛋白剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)蛋白、Bcl-2相关X (Bax)蛋白和Bcl-2蛋白水平,检测心肌细胞中产生的活性氧(ROS)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和丙二醛(MDA)的含量。结果:TGF-β1处理后的心肌细胞中JWA mRNA水平和Bcl-2蛋白水平、CAT、GSH-PX含量均明显高于正常培养的心肌细胞,细胞存活率升高,细胞凋亡率和细胞中Cleaved Caspase-3、Bax蛋白水平、Bax/Bcl-2值、细胞中ROS、MDA含量均降低(P<0.05),与正常培养的心肌细胞相比,差异有统计学意义。结论:抑制JWA的表...

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【部分图文】：

图1Westernblot检测TGF-β1

TGF-β1组心肌细胞中JWAmRNA和蛋白水平明显高于Control组,差异具有统计学意义(P<0.05)。心肌细胞经TGF-β1处理后,细胞中JWA转录和表达水平升高。见图1和表1。表1TGF-β1处理后心肌细胞JWAmRNA和蛋白水平比较(xˉ±s)组别....

图2Westernblot测定转染后心肌细胞中JWA蛋白表达

与Control组相比,si-JWA组心肌细胞中JWAmRNA和蛋白水平及增殖活性明显降低,凋亡率明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。与Control组相比,si-Con组心肌细胞中JWA表达水平、细胞增殖活性和凋亡率没有明显变化,差异无统计学意义(P>0.05)。转....

图3流式细胞术检测各组心肌细胞凋亡水平

与Control组相比,TGF-β1组、si-Con+TGF-β1组、si-JWA+TGF-β1组心肌细胞存活率明显降低,凋亡率明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。与TGF-β1组相比,si-JWA+TGF-β1组细胞存活率明显升高,凋亡率明显降低,差异具有统计学意义(....

图4Westernblot检测各组心肌细胞中CleavedCaspase-3、Bax和Bcl-2的表达水平

与Control组相比,TGF-β1组心肌细胞中CleavedCaspase-3、Bax蛋白水平明显升高,Bcl-2蛋白水平明显降低,Bax/Bcl-2值升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。与TGF-β1组相比,si-JWA+TGF-β1组心肌细胞中CleavedC....

本文编号：3921523