鸽疱疹病毒XY2019株的分离鉴定与UL30基因序列分析

发布时间：2024-03-30 08:38

　　从咸阳市某疑似鸽疱疹病毒感染病例中分离病原,并对其UL30基因分子特征进行分析,为防控鸽疱疹病毒感染提供参考。通过SPF鸡胚传代分离病毒,克隆UL30基因并构建质粒测序比对分析。结果显示,病毒分离传代3次后鸡胚死亡呈现一定的规律性,并出现典型病变。UL30基因克隆测序提示病毒分离成功,命名为XY2019株。XY2019株UL30基因与4株参考序列同源性在99.9%～100%之间,基因进化树上形成2个大分支,XY2019、HLJ、S-18、BJ株处在一个分支上,而AF141890单独在一个分支上。研究提示,不同动物种类、不同国家或地区的PiHV UL30基因均高度保守,遗传性高度稳定。

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【部分图文】：

图1传代后病毒PCR扩增

对收获的尿囊液、绒毛尿囊膜进行病毒PCR扩增,电泳结果表明从样本中成功扩增出了1326bp的目的条带(图1),证实病毒分离成功,命名为XY2019株。2.4UL30基因测序与分析结果

图2UL30基因阳性质粒酶切结果

回收UL30基因片段,连接pGEM-Teasy载体,构建质粒并酶切鉴定,结果显示酶切片段大小符合预期结果(图2)。鉴定正确的阳性质粒测序后成功获得了XY2019株1326bp长度的UL30基因片段,利用DNAStar软件,将获得序列与GenBank中已知参考序列比对,同源性....

图3XY2019株UL30基因与参考序列同源性比较结果

鉴定正确的阳性质粒测序后成功获得了XY2019株1326bp长度的UL30基因片段,利用DNAStar软件,将获得序列与GenBank中已知参考序列比对,同源性结果见图3,系统发生树见图4。图4基于UL30基因构建的基因进化树

图4基于UL30基因构建的基因进化树

图3XY2019株UL30基因与参考序列同源性比较结果GenBank中PiHVUL30基因参考序列仅有4株,参考序列BJ株分离于中国北京市,登录号KC544263,来源于鸽;HLJ株分离于中国黑龙江省,登录号KX589235,来源于野鸽;S-18株分离于墨西哥,登录号NC02....

本文编号：3942099