铝不敏感型拟南芥突变体的特征分析及突变基因筛选

发布时间：2024-04-19 02:35

　　我国设施作物生产中土壤营养元素失衡,土壤呈现酸化趋势是一个较为严重的问题。土壤酸化会增加可溶性铝的含量,抑制植物正常生长和损害其生理功能。植物体内合成的铝激活苹果酸转运蛋白(ALMT1)能促进根系苹果酸的分泌,从而缓解植物受铝离子的胁迫。因此ALMT1在调节苹果酸分泌和植物对铝胁迫耐受的过程中起着关键作用。为深入研究植物耐铝基因ALMT1表达的调控机制,本研究通过诱导获得对铝胁迫不敏感的拟南芥突变体,鉴定和筛选参与铝胁迫信号转导和AtALMT1表达转录因子的相关基因。主要研究结果为:利用甲基磺酸乙酯(EMS)诱导携带绿色荧光蛋白(GFP)AtALMT1启动子的转基因拟南芥,使其产生突变且引起AtALMT1的表达异常,筛选出7个对铝不敏感的拟南芥突变体。通过对比铝离子胁迫拟南芥突变体与野生型的表型差异,发现突变体在根和下胚轴生长上受抑制的程度不同,其中MDI下胚轴长度受到显著抑制,MD4、MD5、MD6、MD7则显著抑制根系生长,而MD2和MD8未能观察到生长明显受抑制。通过检测7个突变体的苹果酸释放量、AtALMT1表达量及铝胁迫相关基因(CAMTA2、STOP1、ALS3、MATE)...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２－１拟南芥种子种植网?

ｍｍｍＪｕｒｎｍｒｎｍ＾??图２－１拟南芥种子种植网?图２－２水培拟南芥幼苗??Ｆｉｇ．?２－１?Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ?ｓｅｅｄｓ?ｐｌａｎｔｅｄ?ｏｎ?ｔｈｅ?ｍｅｓｈ?Ｆｉｇ．?２－２?Ｈｙｄｒｏｐｏｎｉｃ?ｏｆ?Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ?ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ??２．?１．４荧....

图２－５收集拟南芥根系分泌的苹果酸??：ＭＧＲＬ４

广西大学硕士学位论文?错不敏感型拟南芥突变体的特征分析及突变基因筛选??（Ｈｏｅｋｅｎｇａ扣义，２００３）。苹果酸的测量采用有机酸酶循环法（图２－６；附录１），所有实??验至少重复三次并计算均值和方差值（Ｔａｋｉｔａ?ｅｈ／．，?１９９９）。??丨?１?％?，：雕??ｒ＾ｕ?＇?....

图２－６酶循环法测量苹果酸含量原理图??注：通过ＭＤＨ将苹果酸转化为ＮＡＤＨ（上）

广西大学硕士学位论文?错不敏感型拟南芥突变体的特征分析及突变基因筛选??（Ｈｏｅｋｅｎｇａ扣义，２００３）。苹果酸的测量采用有机酸酶循环法（图２－６；附录１），所有实??验至少重复三次并计算均值和方差值（Ｔａｋｉｔａ?ｅｈ／．，?１９９９）。??丨?１?％?，：雕??ｒ＾ｕ?＇?....

图２－７转基因拟南芥中携带绿色荧光蛋白（ＧＦＰ）?ＪＭＺＭ７７启动子的模型??

２．?２．?１拟南芥突变体的表达??初代拟南芥突变体（Ｍｌ）来自ＥＭＳ诱变实验和初步绿色荧光筛选。拟南芥ＪＭＬＭ７７??启动子携带绿色荧光蛋白（ＧＦＰ）（图２－７），通过甲基磺酸乙酯（ＥＭＳ）诱变使其耐铝??基因ＪＭＬＭ７７表达异常，从而筛选出７个绿色荧光不明显的Ｍ２代铝不敏感型....

本文编号：3958099