大鲵MC1R基因的克

发布时间：2024-12-19 03:35

　　 为研究MC1R在两栖动物体色形成中的作用,试验结合转录组分析和电子克隆技术得到大鲵(Andrias davidianus)MC1R部分cDNA序列并进行了生物信息学分析,采用实时荧光定量法检测了大鲵MC1R基因在皮肤、肝脏等10个组织中的表达情况及4种不同体色大鲵皮肤组织中MC1R基因的表达量。结果表明:得到大鲵MC1R部分cDNA长为295 bp,位于该基因编码区。其与人、小鼠等哺乳动物和鸟类MC1R核苷酸同源性在57%～83%。大鲵MC1R基因与粗皮渍螈的亲缘关系最近。该基因在不同组织中均有表达,以皮肤组织表达量最高。4种不同体色大鲵皮肤组织中,黑色皮肤中MC1R基因表达量高于其他体色。说明大鲵MC1R基因在体色形成过程中可能具有与其他两栖动物不同的调控机制。

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验动物
    1.2 主要试剂
    1.3 主要仪器
2 方法
    2.1 实验动物分组
    2.2 RNA提取
    2.3 反转录
    2.4 MC1R基因扩增及荧光定量PCR引物设计与合成
    2.5 MC1R基因序列分析
    2.6 qRT-PCR分析大鲵MC1R和MITF基因的组织特异性表达
    2.7 qRT-PCR分析不同体色大鲵MC1R基因的特异性表达
3 结果与分析
    3.1 RNA提取效果检测
    3.2 MC1R和MITF基因的电子克隆及序列分析
    3.3 MC1R基因核苷酸同源性比较及系统进化树构建
    3.4 大鲵MC1R基因组织表达谱差异
4 讨论



本文编号：4017592