一种抗草甘膦转基因油菜的快速鉴定方法

发布时间：2025-01-14 03:08

　　 为建立一种快速鉴定抗草甘膦转基因油菜的方法,以抗草甘膦转基因油菜品系及后代分离群体为研究材料,利用不同草甘膦浓度滤纸平板进行种子发芽,观察抗性材料和非抗性材料幼胚抗性反应表型,并通过PCR和苗期草甘膦处理进行抗性验证。结果表明,利用0.5～1 g/L的草甘膦溶液处理的抗性材料胚根根毛生长正常,而非抗性材料胚根生长迟缓且光滑无根毛;利用该浓度的处理BC₁和F₂抗性分离群体,幼胚根毛有无性状分离比符合1:1和3:1,幼胚个体的基因组PCR扩增结果与根毛有无呈共分离。通过观察在该浓度草甘膦发芽处理后的幼胚根毛有无,可有效区分抗草甘膦转基因油菜的抗性和非抗性材料。本研究建立的鉴定方法不仅能够对抗草甘膦油菜材料进行快速、准确鉴定,而且能保证材料成活,对抗草甘膦转基因油菜育种和种子纯度鉴定提供技术参考。

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【部分图文】：

图1 群体共分离油菜胚根的发芽状况

以FMV35S为引物扩增ZJ抗油菜品系，PCR阳性和非阳性单株数比值为6:7；以GOX引物扩增ZJ抗油菜品系，PCR阳性和非阳性单株数比值为5:8；以FMV35S引物扩增103469-4群体的PCR阳性和非阳性单株数比值为9:4；以GOX引物扩增103469-4群体的PCR阳性和....

图4 抗草甘膦的供试材料根毛基因组PCR分析

图3供试材料幼胚基因组PCR扩增结果3讨论与结论

图2 草甘膦浓度为1.00 g/L条件下供试材料胚根的发芽状况

对长有根毛的BC1和F2提取DNA，进行PCR，琼脂糖凝胶电泳结果均表现为阳性，且喷施除草剂草甘膦后未发现有死亡现象，这些结果说明草甘膦浓度为0.50～1.00g/L时，幼胚长有根毛的油菜种子含有抗除草剂基因，且苗期对草甘膦表现为抗性（图4）。图3供试材料幼胚基因组PCR扩增....

图3 供试材料幼胚基因组PCR扩增结果

图2草甘膦浓度为1.00g/L条件下供试材料胚根的发芽状况图4抗草甘膦的供试材料根毛基因组PCR分析

本文编号：4026316