抗菌肽L-K6及其改造肽转染性能研究

发布时间：2025-01-20 13:08

　　基因疗法作为一种解决人类遗传疾病的潜在有效方法引起了人们的极大关注。基因载体分为病毒载体和非病毒载体,病毒载体转染效率高但制备起来比较困难较难获得、传递的基因容量较小、特异靶向性能低、有较强的免疫原性、容易产生变异病毒等缺点,因此极大的限制了其在临床上的应用。目前研制安全有效且价格低廉、易实现规模化生产的非病毒基因传递系统是基因治疗的关键。在本文中,我们选择抗菌肽L-K6作为模板进行改造,L-K6是以中国林蛙的皮肤分泌物中分离纯化的天然抗菌肽Temporin-1 CEb为模板得到的改造肽,含有Trp的抗菌肽与癌症细胞膜有良好的破坏作用,可以透过细胞膜与胞内物质发生相互作用。在前期工作基础上,通过在不同位置进行单个Trp残基的替换设计合成了一系列含有Trp的新型抗菌肽I1W、L5W、L12W,发现它们细胞亲和性增高、疏水性增加,推测其可能具有良好的转染能力,因此在本论文中,我们探究了抗菌肽L-K6及其类似物与外源DNA结合的能力,及其细胞内转染性能。首先,通过圆二色谱(CD)实验检测了多肽L-K6、I1W、L5W和L12W与DNA相互作用后的二级结构,结果发现与L-K6相比,I1W、L5W...

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图1.1基因载体体内递送核酸分子的障碍(引自YinH等人，2014)

辽宁师范大学硕士学位论文-3-图1.1基因载体体内递送核酸分子的障碍(引自YinH等人，2014)Figure1.1Barrierstothedeliveryofnucleicacidmoleculesingenevectors[14](fromYinHetal,2014)

图1.2环糊精递送系统示意图(引自HardcastleJ等人，2010）

抗菌肽LK-6及其改造肽转染性能研究-4-1.2病毒载体与非病毒载体1.2.1病毒载体1、慢病毒。逆转录病毒的一个子类，寄生在不分裂细胞，它们具有复制缺陷主要被用来研究体外或体内的基因转染实验，优点是转染效率高[15-18]。2、腺病毒。属于DNA病毒，不整合进入宿主基因组，也不....

图1.3稳定的核酸-脂质颗粒(SNLP)示意图(引自HardcastleJ等人，2010）

抗菌肽LK-6及其改造肽转染性能研究-6-图1.3稳定的核酸-脂质颗粒(SNLP)示意图(引自HardcastleJ等人，2010）Figure1.3Schematicdiagramofstablenucleicacid-lipidparticles(SNLP)[22]（from....

图1.4透膜肽/核酸复合物微粒大小对细胞透膜机制的影响[49]

辽宁师范大学硕士学位论文-7-图1.4透膜肽/核酸复合物微粒大小对细胞透膜机制的影响[49](引自Sahay，G等人，2013）Figure1.4Effectoftheparticlesizeofmembrane-penetratingpeptide/nucleicacidcom....

本文编号：4029299