苹果MdJAZ1基因表达及蛋白互作分析

发布时间：2017-06-15 21:09

  本文关键词：苹果MdJAZ1基因表达及蛋白互作分析，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：【目的】克隆苹果茉莉酸信号途径阻遏因子基因MdJAZ1,并对其表达及蛋白互作进行分析,为进一步研究MdJAZ1的功能奠定基础。【方法】以TIFY及Jas功能域为探针,在苹果基因组中进行比对,获得多个同源基因,对其中的一个基因设计引物进行克隆;利用DNAMan软件对该基因编码蛋白的分子量、等电点进行预测;利用SMART在线分析软件对该蛋白的功能域进行分析;利用MEGA5.0对该蛋白与拟南芥JAZ家族蛋白构建系统发育树;利用荧光定量PCR分析该基因在苹果不同组织器官、茉莉酸甲酯及创伤处理下的表达情况;利用Plant CARE在线软件分析该基因启动子区域的顺式作用元件;利用酵母双杂交系统检测MdJAZ1蛋白的二聚化及其与拟南芥AtCOI1蛋白的互作关系。【结果】MdJAZ1开放阅读框为1 149 bp,编码382个氨基酸残基,其蛋白的分子量为40.536kDa,等电点9。氨基酸序列分析显示,该蛋白包含保守的TIFY及Jas结构域;系统发育树分析显示,MdJAZ1蛋白与拟南芥JAZ家族AtJAZ3、AtJAZ4亲缘关系最近;qPCR结果显示,MdJAZ1在苹果的根、茎、叶、花及果实等组织中都有表达,但表达水平存在明显差异,其中根中的表达量最高,果实中的表达量最低;该基因还能被茉莉酸甲酯及创伤处理诱导表达,均在1 h内达到最高表达水平;启动子分析显示,MdJAZ1启动子中包含多个ABA、乙烯、抗病及逆境胁迫等响应元件,此外,还包含多个MYB结合位点;酵母双杂交结果显示,MdJAZ1蛋白能与其自身相互作用形成同源二聚体,还可与拟南芥中同源性较近的AtJAZ3、AtJAZ4蛋白相互作用形成异源二聚体,并且在冠菌素存在时,MdJAZ1蛋白可与拟南芥F-box蛋白AtCOI1相互作用。【结论】MdJAZ1受茉莉酸甲酯及创伤诱导表达,其蛋白能形成同源及异源二聚体,且在冠菌素存在时可与AtCOI1互作。
【作者单位】： 中国农业科学院果树研究所/农业部园艺作物种质资源利用重点实验室;
【关键词】： 苹果 茉莉酸 MdJAZ 表达 蛋白互作
【基金】：国家现代农业产业技术体系建设专项(CARS-28) 辽宁省博士启动基金(201501031) 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(0032015019)
【分类号】：S661.1
【正文快照】： 不敏感等[22];大豆中的研究显示,Gs JAZ2过量表达0引言提高植株对盐碱的抗性[23]。JAZ蛋白能够与转录因子【研究意义】茉莉酸(jasmonic acid,JA)是植相互作用,进而抑制转录因子的转录活性。MYC是茉物重要的信号分子之一,在植物生长发育、病菌响应莉酸信号途径下游重要的转录因

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本文编号：453493