滇龙胆GrCMS基因的克隆与表达分析
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【摘要】:2-C-甲基-D-赤藓醇4-磷酸胞苷酰转移酶是赤藓糖磷酸酯(MEP)途径中的第三个催化酶。以滇龙胆转录组为基础,采用RT-PCR技术从滇龙胆幼叶克隆2-C-甲基-D-赤藓醇4-磷酸胞苷酰转移酶基因GrCMS,并进行原核表达和组织特异性表达分析。序列分析显示,GrCMS基因(登录号KJ917164)开放阅读框(ORF)长933 bp,编码310氨基酸,推测分子量为34.23 kD,等电点为7.68。蛋白质序列分析显示,GrCMS无信号肽,为亲水稳定蛋白,主要由α-螺旋和无规则卷曲构成,可能定位叶绿体;具有CMS保守结构域。进化分析结果表明,GrCMS蛋白与长春花CrCMS蛋白亲缘关系最近。原核表达结果表明,GrCMS与预期蛋白大小一致。定量PCR结果表明,GrCMS基因主要在叶中表达。结果为进一步研究该基因功能和龙胆苦苷生物合成途径奠定基础。
【作者单位】: 玉溪师范学院资源环境学院;云南省农业科学院药用植物研究所;
【关键词】: 滇龙胆 -C-甲基-D-赤藓醇-磷酸胞苷酰转移酶 基因克隆 表达分析
【基金】:国家自然科学基金(81260608) 云南省教育厅重点项目(2015Z171) 科技部“十二五”国家科技支撑计划项目
【分类号】:S567.239;Q943.2
【正文快照】: 滇龙胆(Gentiana rigescens)为常用大宗药材,是200多种中药的主要成分[1]。近年来,龙胆市场需求量年递增约10%,国内外市场对龙胆的需求量高达3 000~4 000吨,导致野生滇龙胆遭到人 为大肆破坏[1]。2013年7月,云南省启动了龙胆草航天育种工程,其目标主要是提高主要药效成分龙胆
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