枯草芽孢杆菌胺氧化酶基因的克隆与表达

发布时间：2017-06-21 19:09

  本文关键词：枯草芽孢杆菌胺氧化酶基因的克隆与表达，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：以细菌型豆豉工业发酵菌种枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BJ3-2为材料,根据NCBI中菌株B.subtilis 168的胺氧化酶(AMO)基因序列设计同源引物,克隆获得菌株B.subtilis BJ3-2的胺氧化酶基因YobN序列。测序结果显示,YobN基因开放阅读框(ORF)长为1 437 bp,编码478个氨基酸,分子质量为53.79 ku,与菌株B.subtilis 168同源性达98%。目的基因克隆至原核表达载体,获得重组菌pET28a-YobN/BL21,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果显示,浓度为1.0 mmol/L的异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)22℃诱导5 h,表达量最高达1.30 mg/mL。该研究为AMO活性的研究奠定了基础,对豆类发酵食品中生物胺的控制具有重要意义。
【作者单位】： 贵州大学生命科学学院;
【关键词】： 枯草芽孢杆菌 胺氧化酶 基因克隆 基因表达
【基金】：国家自然科学基金项目(31260394/C200207)
【分类号】：Q78;TQ925
【正文快照】： 大豆起源于中国,大豆及其制品是东方食品的精华,是中国传统食品的“瑰宝”。我国传统豆制品制作历史悠久,品种非常丰富[1]。豆豉、腐乳、豆酱、酱油并称为我国四大传统发酵豆制品[2]。大豆蛋白质中含有人体必需的8种氨基酸,且具有多种保健功能[3]。豆豉作为中国传统豆制品中的

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