铁皮石斛DoCDPK基因的克隆与表达分析

发布时间：2017-06-21 19:12

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【摘要】：利用RACE技术和RT-PCR相结合,从铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)中克隆得到长度分别为1 863和1 729 bp的钙依赖蛋白激酶(calcium-dependent protein kinase)基因DoCDPK1与DoCDPK2的cDNA全长序列,开放阅读框分别为1 539和1 536 bp,编码512和511个氨基酸,编码蛋白表现为亲水性,结构稳定,二级结构主要由α 螺旋和无规卷曲构成。qRT-PCR分析结果表明DoCDPK1和DoCDPK2主要在铁皮石斛叶片中表达;4℃低温和400 mmol·L~(-1) NaCl处理后,DoCDPK1和DoCDPK2在各个时间点上(2、4、8、12和24 h)的表达量有不同程度提高,而100 mmol·L~(-1) ABA处理后DoCDPK1和DoCDPK2的表达量呈现不同变化趋势,推测DoCDPK1和DoCDPK2参与低温等非生物胁迫的响应。
【作者单位】： 浙江农林大学亚热带森林培育国家重点实验室培育基地浙江省铁皮石斛产业技术创新战略联盟;
【关键词】： 铁皮石斛 CDPK基因 基因克隆 逆境胁迫 基因表达
【基金】：浙江省重大科技专项(2012C12912-9)
【分类号】：S567.239
【正文快照】： 铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)为兰科石斛属多年生草本植物,是传统名贵珍稀中药材,具有滋阴清热、益胃生津等功效(吴韵琴和斯金平,2010)。20世纪90年代以来,随着铁皮石斛组织培养技术的发展,其种植规模得到突破,但在铁皮石斛人工种植栽培过程中,许多非生物

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