杨树SAMT基因超表达载体的构建及遗传转化

发布时间：2017-06-24 15:04

  本文关键词：杨树SAMT基因超表达载体的构建及遗传转化，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：一年生草本植物受到病原菌侵染时,体内的水杨酸甲基转移酶基因(salicylic acid methyltransferase,SAMT)能将植物侵染部位产生的水杨酸(salicylic acid,SA)转化为水杨酸甲酯(methyl salicylate,Me SA),在SA信号转导和植物系统获得抗性(systemic acquired resistance,SAR)中起着重要作用。而多年生木本植物中SAMT基因的功能还有待进一步验证。本研究根据毛果杨(Populus trichocarpa)SAMT基因序列,设计了84K杨SAMT引物,利用Gateway克隆技术,在BP反应酶作用下,使带att B接头的SAMT基因全长开放阅读框与入门载体p DONRTM222进行BP重组反应,将目的基因转入入门载体;转化大肠杆菌(Escherichia coli)感受态细胞DH5α后提取的质粒用MLUⅠ进行酶切,然后在LR酶作用下与超表达载体p MDC32进行LR重组反应,将SAMT转入表达载体,成功构建了SAMT的超表达载体。通过农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的遗传转化,获得了SAMT超表达的84K杨转基因植株。为今后研究该基因在杨树抗溃疡病中的功能以及杨树在获得SAR和其他方面的作用提供了基础资料,同时也为研究该基因在其他多年生木本植物中的功能提供参考。
【作者单位】： 中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所/国家林业局森林保护学重点实验室;河南师范大学生命科学学院;中国林业科学研究院林业新技术研究所;南京林业大学南方现代林业协同创新中心;
【关键词】： K杨 水杨酸甲基转移酶基因(SAMT) 超表达 载体构建 遗传转化
【基金】：林业公益性行业科研专项经费(No.201204501) 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(No.CAFYBB2014MB002)
【分类号】：S792.11
【正文快照】： 杨树(Populus spp.)是世界上栽培最广泛的树种之一,但病害的发生和发展也相当严重,已成为其主要的种植障碍(沈瑞祥,1989)。我国是世界上杨树人工林栽培面积最大的国家(曾大鹏,2002),在我国森林重大生物灾害界定的19类灾害中,杨树占6类,其中由葡萄座腔菌(Botryosphaeria do-thi

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本文编号：478537